Anticorpo Policlonal de Coelho Phospho-AKT1-S473 para WB, IHC-P, ELISA - P31749

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do AKT1

• O AKT1 é uma das três serina/treonina proteínas quinases intimamente relacionadas (AKT1, AKT2, AKT3) que regulam o metabolismo, proliferação, sobrevivência celular, crescimento e angiogênese. Referências relacionadas: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136
• O AKT1 fosforila TBC1D4, desencadeando a ligação às proteínas 14-3-3 e promovendo o transporte de glicose estimulado por insulina para as células. Referências relacionadas: PMID:11994271
• Ativa a sinalização mTORC1 fosforilando TSC2, levando à síntese proteica aprimorada e ao crescimento celular. Referências relacionadas: PMID:12150915 PMID:12172553
• O AKT1 promove a sobrevivência celular fosforilando MAP3K5/ASK1, o que reduz a apoptose induzida por estresse oxidativo. Referências relacionadas: PMID:11154276
• Fosforila os fatores de transcrição FOXO, levando à sua retenção citoplasmática e inibição de genes pró-apoptóticos e de parada do ciclo celular. Referências relacionadas: PMID:10358075
• O AKT1 regula positivamente a transcrição dependente de NF-kappa-B e a atividade de CREB1, impulsionando a expressão de genes pró-survivais como BCL2 e MCL1. Referências relacionadas: PMID:9829964
• A proteína se localiza no citoplasma, núcleo, membrana celular e espaço intermembranar mitocondrial, refletindo seus diversos papéis de sinalização.
• A expressão de AKT1 aumenta durante a progressão do câncer de próstata e de mama; a forma fosforilada em Tyr-176 está elevada nos estágios invasivos e metastáticos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético em torno de S473. Para garantir a detecção apenas de AKT1 fosforilado, considere o uso de inibidores de fosfatases durante o preparo da amostra e inclua controles de bloqueio com peptídeo não fosforilado.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de 56 kDa. Valide o anticorpo usando lisados de células estimuladas versus não estimuladas.
• Em IHC-P, otimize a recuperação de antígeno e inclua o bloqueio com peptídeo não fosfo para confirmar a especificidade fosfo.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato é relatada; no entanto, valide o desempenho em seus sistemas específicos de tecido/célula.

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