Phospho-AKT1-T308 Rabbit pAb - P31749

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do AKT1

• O AKT1 é um membro da família de serinas/treoninas quinases AKT que medeia diversos processos celulares, incluindo metabolismo, proliferação, sobrevivência, crescimento e angiogênese, fosforilando numerosos alvos a jusante. Referências relacionadas: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136 PMID:21432781

• Desempenha um papel central na sinalização da insulina, promovendo a captação de glicose por meio da translocação de SLC2A4/GLUT4 e regulando a síntese de glicogênio através da fosforilação inibitória de GSK3A (Ser-21) e GSK3B (Ser-9).

• O AKT1 promove a síntese proteica e o crescimento celular ao fosforilar TSC2 em Ser-939 e Thr-1462, ativando assim a via mTORC1. Referências relacionadas: PMID:12150915 PMID:12172553

• Regula a sobrevivência celular inibindo fatores pró-apoptóticos: fosforilando MAP3K5/ASK1 em Ser-83 para suprimir a apoptose induzida por estresse oxidativo e fosforilando BAD para inativar sua função pró-apoptótica. Referências relacionadas: PMID:11154276 PMID:10926925

• O AKT1 fosforila fatores de transcrição FOXO (FOXO1 em Thr-24, Ser-256, Ser-319; FOXO3 e FOXO4 em sítios equivalentes), levando à sua retenção citoplasmática e inativação, o que promove a proliferação celular. Referências relacionadas: PMID:10358075

• A nível subcelular, o AKT1 localiza-se no citoplasma, núcleo, membrana celular e espaço intermembranar mitocondrial, consistente com seus múltiplos papéis de sinalização.

• O AKT1 é amplamente expresso em tecidos humanos, com níveis proteicos aumentados em cânceres de próstata e mama, particularmente a forma fosforilada em Tyr-176 mostrando expressão elevada durante a progressão do câncer de mama.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para western blotting, considere o uso de lisatos celulares estimulados com insulina ou tratados com fatores de crescimento como controles positivos, e inclua sempre inibidores de fosfatases durante o preparo da amostra para preservar a fosforilação em Thr308.
• Valide a especificidade comparando o sinal com um anticorpo total de AKT1 e teste o anticorpo no sistema modelo relevante (humano, camundongo ou rato) para confirmar a banda esperada em ~56 kDa.
• Para aplicações de ELISA, verifique a detecção do peptídeo fosforilado em comparação com a contraparte não fosforilada e otimize empiricamente as concentrações de revestimento e as diluições do anticorpo.

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