Anticorpo Monoclonal de Coelho Phospho-AMPKα1-S496 para WB, ELISA - Q13131

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da AMPKα1

• AMPKα1, codificada pelo gene PRKAA1, é a subunidade alfa-1 catalítica da proteína quinase ativada por AMP (AMPK) heterotrimérica, um sensor central de energia celular.
• Em resposta a níveis baixos de ATP intracelular, AMPKα1 fosforila enzimas metabólicas chave e fatores de transcrição para inibir processos anabólicos (síntese de lipídios, proteínas e carboidratos) e promover vias catabólicas, restaurando assim a homeostase energética. Referências relacionadas: PMID:17307971, PMID:17712357, PMID:24563466
• AMPKα1 regula diretamente o metabolismo lipídico ao fosforilar e inativar as acetil-CoA carboxilases (ACACA e ACACB), a HMG-CoA redutase (HMGCR) e a lipase sensível a hormônio (LIPE), controlando assim a síntese de ácidos graxos e colesterol.
• Também desempenha um papel crítico na homeostase da glicose ao fosforilar CRTC2/TORC2 (levando ao sequestro citoplasmático) e promover a translocação de GLUT4 para a membrana plasmática.
• Além do metabolismo, AMPKα1 suprime o crescimento e a proliferação celular ao inibir a via mTORC1 por meio da fosforilação de TSC2, RPTOR e WDR24, e ativa a autofagia via fosforilação de ULK1 e WDR45/WIPI4. Referências relacionadas: PMID:14651849, PMID:18439900, PMID:20160076, PMID:21205641, PMID:28561066, PMID:36732624, PMID:37079666
• A localização subcelular inclui citoplasma, núcleo e endossomos tardios, o que é consistente com seus papéis na regulação metabólica, transcrição gênica e sinalização endossomal.
• AMPKα1 é uma fosfoproteína regulada por fosforilação em vários resíduos; a fosforilação na posição Ser496 foi identificada e pode influenciar sua atividade quinase ou localização.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Sempre inclua inibidores de fosfatase durante a lise celular e preparação da amostra para preservar o epitopo fosforilado.
• Valide a especificidade tratando as amostras com proteína fosfatase lambda ou por competição com o peptídeo fosforilado imunizante; a perda de sinal confirma a fosfo-especificidade.
• Para Western blot, espera-se uma banda de aproximadamente 64 kDa em linhas celulares humanas ou de camundongo; a ativação da AMPK por AICAR, metformina ou privação de glicose pode melhorar a detecção.
• Em ELISA, considere usar este anticorpo em combinação com um anticorpo de captura pan-AMPKα para quantificar os níveis de Phospho-AMPKα1 (S496).

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