Anticorpo Monoclonal de Coelho Phospho-AMPKα1-T183+AMPKα2-T172 - Q13131 / P54646

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da AMPKα

• AMPKα1 (PRKAA1) e AMPKα2 (PRKAA2) são duas isoformas da subunidade alfa catalítica do complexo heterotrimérico AMPK, que também contém subunidades regulatórias beta e gama.
• Subunidade catalítica da AMPK, uma quinase sensora de energia que ativa vias produtoras de energia e inibe processos consumidores de energia (por exemplo, biossíntese de proteínas, carboidratos, lipídios) para manter a homeostase energética celular.
  Referências relacionadas:
  PMID:17307971 PMID:17712357 PMID:24563466
• Regula o metabolismo lipídico promovendo a lipólise via fosforilação da CHKA (PubMed:34077757) e inativando enzimas biossintéticas de lipídios como ACACA, ACACB e HMGCR (Por similaridade).
  Referências relacionadas:
  PMID:34077757
• Fosforila reguladores transcricionais chave (por exemplo, CRTC2, FOXO3, HDAC5, MEF2C, MLXIPL, p53) e histona H2B para modular a expressão gênica ligada ao metabolismo energético e respostas ao estresse.
  Referências relacionadas:
  PMID:11518699 PMID:11554766 PMID:15866171
• Atua como um regulador negativo crítico do complexo de sinalização mTORC1 ao fosforilar RPTOR, TSC2 e WDR24, e promove a autofagia ativando ULK1 e WDR45 sob limitação de nutrientes.
  Referências relacionadas:
  PMID:14651849 PMID:18439900 PMID:20160076 PMID:21205641 PMID:28561066 PMID:36732624 PMID:37079666
• Além disso, a AMPKα1 fosforila a CASP6 para prevenir sua ativação (PubMed:32029622), regula a remodelação do citoesqueleto de actina (PubMed:17486097) e modula a fragmentação mitocondrial e o recrutamento da ALDH7A1 sob condições de estresse.
  Referências relacionadas:
  PMID:32029622 PMID:17486097 PMID:36367943 PMID:31492851 PMID:40233740
• Subcelularmente, a AMPKα1 localiza-se no citoplasma, núcleo e endossomos tardios, consistente com seus amplos papéis regulatórios.
• Caracterizada como uma serina/treonina-proteína quinase, fosfoproteína e glicoproteína, com splicing alternativo relatado.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um peptídeo fosfo-sintético abrangendo os sítios de fosforilação do loop de ativação (Thr183 na AMPKα1 e Thr172 na AMPKα2), tornando-o específico para as formas ativas e fosforiladas da AMPKα.
• Para Western blot, as bandas esperadas são observadas aproximadamente em 64 kDa (AMPKα1) e 62/65 kDa (AMPKα2); a inclusão de inibidores de fosfatase durante o preparo da amostra é crítica para preservar a fosforilação.
• Valide a especificidade da detecção tratando lisados com λ‑fosfatase ou por inibição competitiva com o peptídeo não‑fosforilado em seu sistema de amostra relevante (por exemplo, linhagens celulares humanas, de camundongo ou rato).
• Aplicações de ELISA podem exigir otimização da concentração do antígeno de revestimento e das condições de detecção devido à natureza do imunógeno peptídico.
• Observe que o anticorpo é validado para WB e ELISA; o desempenho em outras aplicações, como IHC, IF ou IP, deve ser testado empiricamente.

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