Anticorpo Policlonado de Coelho Phospho-AMPKa1-T183/AMPKa2-T172 para WB, ELISA - Q13131 / P54646

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de AMPKα1/AMPKα2

• A subunidade catalítica alfa-1 da proteína quinase ativada por 5'-AMP (AMPKα1, codificada por PRKAA1) funciona como o principal sensor de energia em células eucarióticas, fosforilando uma ampla gama de substratos para orquestrar a adaptação metabólica. Referências relacionadas: PMID:17307971, PMID:17712357, PMID:24563466
• Inibe vias anabólicas incluindo a biossíntese de proteínas, carboidratos e lipídios, ao mesmo tempo que promove processos catabólicos como a oxidação de ácidos graxos e a captação de glicose, em parte através da fosforilação direta de enzimas metabólicas como ACACA e HMGCR.
• AMPKα1 também regula a expressão gênica fosforilando reguladores transcriptionais (ex.: CRTC2, FOXO3, SREBF1), impactando a gliconeogênese, o metabolismo lipídico e as respostas ao estresse. Referências relacionadas: PMID:11518699, PMID:11554766, PMID:15866171
• Além do metabolismo, AMPKα1 controla o crescimento celular e a autofagia através da inibição de mTORC1 (fosforilando RPTOR, TSC2, FNIP1) e da ativação de ULK1, garantindo a sobrevivência sob estresse nutricional. Referências relacionadas: PMID:14651849, PMID:18439900, PMID:20160076, PMID:21205641, PMID:37079666
• Localizada no citoplasma, núcleo e endossomos tardios, AMPKα1 se desloca dinamicamente para fosforilar alvos em múltiplos compartimentos, ligando a localização subcelular à especificidade funcional.
• AMPKα1 é uma serina/treonina quinase e fosfoproteína, com atividade rigidamente controlada por fosforilação, particularmente em resíduos dentro da alça de ativação; também sofre ubiquitinação e acetilação.
• O splicing alternativo produz múltiplas isoformas, podendo contribuir para a regulação tecido-específica e resultados de sinalização distintos.
• A AMPKα2 intimamente relacionada (PRKAA2, SWISS P54646) compartilha alta homologia e também é detectada por este anticorpo, permitindo a análise combinada de ambas as subunidades catalíticas.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético correspondente aos resíduos ao redor de Thr183 do PRKAA1 humano. Este anticorpo é adequado para detectar níveis endógenos de AMPKα1 e AMPKα2 fosforilados em Western blotting, com bandas esperadas em torno de 64 kDa (AMPKα1) e 62–65 kDa (AMPKα2).
• Para Western blotting, considere usar tampões de lise específicos para fosforilação suplementados com inibidores de fosfatase para preservar o epitopo fosforilado e otimizar a intensidade do sinal.
• Em aplicações de ELISA, o anticorpo pode funcionar como reagente de captura ou detecção; inclua controles de peptídeo fosforilado e valide o desempenho contra as contrapartes não fosforiladas para garantir a especificidade.
• A reatividade cruzada com amostras de camundongo e rato é esperada devido à alta conservação da sequência ao redor dos sítios de fosforilação, mas sempre verifique a detecção na sua matriz de amostra específica e nas condições experimentais.

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