pAb de coelho anti-Fosfo-AP2M1-T156 para WB e ELISA - Q96CW1

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de AP2M1 (subunidade mu do complexo AP-2)

• AP2M1 codifica a subunidade μ2 do complexo adaptador de proteínas heterotetrâmérico AP-2, que funciona como um adaptor de carga associado à clatrina na formação de vesículas revestidas por clatrina. Referências relacionadas: PMID:12694563, PMID:12952941, PMID:14745134
• A subunidade μ2 reconhece diretamente os motivos de endocitose Y‑X‑X‑Φ e [ED]‑X‑X‑X‑L‑[LI] nas caudas citosólicas de cargas transmembrana, permitindo a seleção específica para a endocitose mediada por clatrina. Referências relacionadas: PMID:16581796, PMID:12694563, PMID:14745134
• A fosforilação de μ2 em Thr‑156 pela quinase AAK1 desencadeia uma mudança conformacional que expõe o sítio de ligação Y‑X‑X‑Φ, permitindo o contato com a carga na membrana plasmática. Referências relacionadas: PMID:11877457
• Além da endocitose clássica mediada por clatrina, a AP‑2 participa do tráfego não dependente de clatrina regulado por ARF6 e da reciclagem das membranas das vesículas sinápticas a partir das superfícies pré-sinápticas. Referências relacionadas: PMID:19033387, PMID:12694563
• Em neurônios hipocampais, a AP‑2 medeia a endocitose dependente de atividade da ADAM10 durante a potenciação de longo prazo. Referências relacionadas: PMID:23676497
• A proteína se localiza na membrana celular e nas fossas revestidas por clatrina, consistente com seu papel na formação de vesículas endocíticas. É expressa no cérebro em nível proteico e é classificada sob palavras-chave que incluem endocitose, fosfoproteína, splicing alternativo e variantes de doenças (epilepsia, deficiência intelectual).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético fosforilado ao redor do Thr156 da AP2M1 humana; espera-se que o anticorpo reconheça especificamente a forma fosforilada. Para Western blotting, use inibidores de fosfatase durante a preparação da amostra para preservar o sinal fosforilado.
• No WB, é esperada uma banda de aproximadamente 50 kDa (peso molecular observado). Considere incluir um controle desfosforilado ou competição por antígeno com o peptídeo não fosforilado para confirmar a especificidade fosfo-específica.
• Para ELISA, o peptídeo fosforilado pode servir como controle positivo; valide a linearidade e a sensibilidade na matriz de amostra relevante.
• O anticorpo tem reatividade cruzada com amostras humanas e de camundongo. Se trabalhar com outras espécies, verifique a homologia de sequência ao redor do Thr156 antes do uso.

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