Anticorpo policlonal de coelho anti-Phospho-APP-T668 para WB e ELISA - P05067

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína Precursora de Amiloide-beta

• A proteína precursora de amiloide-beta (APP) é uma glicoproteína transmembrana tipo I que existe em várias isoformas, com a APP695 predominando em neurônios e a APP751/APP770 em células não neuronais. Também é conhecida como ABPP, APPI e peptídeo amiloide vascular cerebral.
• A APP funciona como um receptor de superfície celular envolvido no crescimento de neuritos, adesão neuronal e axonogênese. A interação entre moléculas de APP em células vizinhas promove a sinaptogênese. Referências relacionadas: PMID:25122912
• A APP atua como um receptor de membrana da cinesina I, mediando o transporte anterógrado axonal da beta-secretase e da presenilina 1, e desempenha um papel no transporte de carga para as sinapses. Referências relacionadas: PMID:17062754 PMID:23011729
• A APP sofre processamento proteolítico para gerar peptídeos amiloide-beta, que são quelantes de metal lipofílicos que se ligam a cobre, zinco e ferro. Esses peptídeos promovem a agregação e fosforilação da tau e podem induzir estresse oxidativo e neurotoxicidade.
• Subcelularmente, a APP está localizada na membrana celular, pericário, cones de crescimento, invaginações revestidas por clatrina, endossomos iniciais e também é secretada. Pode ser encontrada na superfície celular, núcleo e citoplasma sob certas condições.
• Especificidade tecidual: A APP é altamente expressa no cérebro e no líquido cefalorraquidiano, com os níveis mais altos no córtex frontal. Também é expressa no rim, coração e baço. A isoforma APP695 é neuronal, enquanto a APP751 é abundante em linfócitos T.
• A fosforilação em Thr668 (T668) é uma modificação regulatória chave da APP. Este anticorpo reconhece especificamente a forma fosforilada, permitindo o estudo da sinalização e processamento dependentes de fosforilação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi produzido contra um peptídeo fosforilado sintético correspondente aos resíduos ao redor do Thr668 da APP humana. É adequado para detectar níveis endógenos de APP apenas quando fosforilada em T668.
• Para Western blot, uma diluição inicial típica de 1:500–1:2000 é comum para anticorpos policlonais; otimize com base na sua amostra e sistema de detecção. Valide a especificidade tratando lisados celulares com fosfatase lambda.
• O peso molecular previsto da APP de comprimento total é de ~87 kDa, mas modificações pós-traducionais e processamento proteolítico podem gerar múltiplas bandas. Inclua marcadores de peso molecular apropriados.
• Para ELISA, use como anticorpo de captura ou detecção de acordo com o formato do seu ensaio; o emparelhamento com outro anticorpo anti-APP pode ser necessário para ELISA sanduíche.
• Reatividade cruzada com camundongo e rato foi relatada; verifique no seu tecido alvo para confirmar a reatividade cruzada e especificidade.
• Considere usar amostras frescas ou adequadamente armazenadas e evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento para preservar o estado de fosforilação.

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