Anticorpo Monoclonal de Coelho Phospho-ATM-S1981 para WB, IF-P, ELISA - Q13315

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ATM

• ATM é uma proteína quinase serina/treonina que atua como um sensor primário de danos no DNA, reconhecendo quebras de fita dupla e ativando a sinalização de checkpoint, apoptose e vias de reparo do DNA. Referências relacionadas: PMID:10550055 PMID:10839545 PMID:10910365
• Ele reconhece a sequência consenso de substrato [ST]-Q e fosforila vários alvos críticos, incluindo H2AX (Ser139), CHEK2, p53, BRCA1 e múltiplas proteínas de reparo do DNA, coordenando assim a parada do ciclo celular e a resposta ao dano. Referências relacionadas: PMID:10550055 PMID:10766245 PMID:10802669
• ATM se localiza no núcleo, vesículas citoplasmáticas, centrossomo e peroxissomos, refletindo seu envolvimento não só no reparo do DNA nuclear, mas também em processos citoplasmáticos como tráfego de vesículas e pexofagia. Referências relacionadas: PMID:26344566
• É expresso de forma ubíqua em uma ampla gama de tecidos, incluindo pâncreas, rim, músculo esquelético, fígado, pulmão, cérebro e órgãos linfoides, o que é consistente com seu papel fundamental na estabilidade do genoma.
• ATM é uma fosfoproteína com múltiplos sítios de fosforilação, e modificações chave regulam sua atividade quinase e recrutamento para sítios de dano no DNA; ele também sofre acetilação.
• Mutações de perda de função no ATM causam ataxia telangiectasia, uma doença multissistêmica caracterizada por neurodegeneração progressiva, imunodeficiência e predisposição ao câncer.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Devido ao alto peso molecular do ATM (351 kDa), considere tempos de transferência estendidos ou tampões de transferência modificados para Western blotting, para garantir uma transferência eficiente da proteína.
• Para a detecção do ATM fosforilado, inclua inibidores de fosfatase durante a preparação da amostra para preservar o sinal de fosforilação de S1981.
• Em experimentos de imunoprecipitação (IP/IF-P), valide a especificidade do anticorpo usando agentes indutores de dano no DNA (por exemplo, radiação ionizante) para estimular a fosforilação do ATM.
• Para ELISA, estabeleça as diluições ótimas de revestimento e do anticorpo usando controles de fosfopeptídeo recombinante para garantir a seletividade para a forma fosforilada de S1981.

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