Anticorpo Monoclonal de Coelho Phospho-ATR-S428 para WB e ELISA - Q13535

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Serina/treonina-proteína quinase ATR

• ATR é uma proteína quinase de serina/treonina da família PIKK que atua como sensor de danos no DNA, reconhecendo sequências consenso [ST]-Q e fosforilando alvos downstream sob estresse genotóxico (PubMed:10597277, PubMed:10608806, PubMed:10859164). Referências relacionadas: PMID:10597277, PMID:10608806, PMID:10859164
• Substratos chave incluem CHEK1, BRCA1, p53/TP53, RPA2 e RAD17, cuja fosforilação inibe a replicação do DNA e a mitose, além de promover o reparo, a recombinação e a apoptose (PubMed:11114888, PubMed:11418864, PubMed:11865061). Referências relacionadas: PMID:11114888, PMID:11418864, PMID:11865061
• Fosforila diretamente a histona H2AX na Ser-139 nos locais de dano e é necessária para a ubiquitinação de FANCD2 (PubMed:11673449, PubMed:15314022). Referências relacionadas: PMID:11673449, PMID:15314022
• É fundamental para manter a estabilidade de sítios frágeis e a duplicação correta do centrossomo (PubMed:12526805). Referências relacionadas: PMID:12526805
• Regula a transição S-G2 ao restringir a atividade de CDK1 durante a fase S (PubMed:30139873). Referências relacionadas: PMID:30139873
• Atua no envelope nuclear: detecta estresse mecânico, se transloca para o local para fosforilar CHEK1 e promove a ruptura do envelope nuclear por meio da fosforilação de LMNA; também medeia a ruptura de micronúcleos e a ativação imune inata do sistema cGAS-STING (PubMed:25083873, PubMed:37832547, PubMed:37788673). Referências relacionadas: PMID:25083873, PMID:37832547, PMID:37788673
• Regula positivamente o reinício de forks de replicação parados após sua ativação pelo complexo de estrutura KHDC3L-OOEP.
• É predominantemente nuclear, se associando a cromossomos e ao envelope nuclear; expressa-se de forma ubíqua, com maior presença no testículo; uma isoforma alternativa (isoforma 2) é encontrada apenas no pâncreas, placenta e fígado.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um fosfopeptídeo sintético correspondente aos resíduos ao redor da Ser-428 da ATR humana; a especificidade deve ser confirmada por meio de competição com peptídeo fosforilado versus não fosforilado ou lisados tratados com fosfatase.
• Para Western blotting, observe o grande tamanho da ATR (~301 kDa); use géis gradiente, tempos de transferência estendidos e marcadores de alto peso molecular para uma detecção ideal.
• As aplicações validadas são WB e ELISA; os usuários finais devem titular o anticorpo para determinar as concentrações de trabalho ideais para suas condições específicas de ensaio.
• Como a ATR é uma quinase de baixa abundância, o enriquecimento ou imunoprecipitação prévia à WB pode melhorar o sinal em alguns tipos de amostra.
• Armazene o anticorpo de acordo com a condição de envio (bolsa de gelo) e evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento.

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