Anticorpo Policlonal Phospho-B-Raf (S445) para WB, ELISA - P15056

• Proteína quinase serina/treonina que transduz sinais mitogénicos da membrana celular para o núcleo através da fosforilação e ativação do MAP2K1, desencadeando assim a via de transdução de sinal do quinase MAP (PubMed:21441910, PubMed:29433126). Referências relacionadas: PMID:21441910, PMID:29433126
• Também fosforila PFKFB2, ligando a sinalização de fatores de crescimento à regulação metabólica (PubMed:36402789). Referências relacionadas: PMID:36402789
• Pode desempenhar um papel nas respostas pós-sinápticas dos neurónios hipocampais, sugerindo envolvimento na sinalização neuronal (PubMed:1508179). Referências relacionadas: PMID:1508179
• Localiza-se no núcleo, citoplasma e membrana celular, consistente com o seu papel na transmissão de sinal.
• Expresso principalmente no cérebro e testículos, com níveis mais baixos noutros tecidos.
• Passa por extensas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação, metilação e ubiquitinação, que regulam a sua atividade e interações.
• Um proto-oncogene frequentemente mutado em cancros humanos; variantes associadas a doenças estão ligadas a cardiomiopatia, surdez, displasia ectodérmica e deficiência intelectual (segundo palavras-chave do UniProt).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi produzido contra um fosfopeptídeo correspondente aos resíduos em torno de S445 do BRAF humano; espera-se que reconheça o B‑Raf apenas quando fosforilado neste local.
• Para WB e ELISA, considere o uso de inibidores de fosfatases durante a preparação da amostra para preservar o estado de fosforilação S445.
• Ao configurar o WB, valide o sinal tratando as amostras com lambda fosfatase ou comparando com anticorpos B‑Raf não específicos para fosfo.
• As diluições de trabalho ideais para WB e ELISA devem ser determinadas empiricamente; use controlos positivos (por exemplo, lisados de células estimuladas conhecidas por ativarem a via MAPK).
• A reatividade cruzada com o B‑Raf de rato foi confirmada; para outras espécies, teste experimentalmente, pois o alinhamento de sequências pode sugerir reatividade.

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