Anticorpo Policlonal de Coelho Fosfo-Beclina 1 (Ser15) para WB e ELISA - Q14457

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Beclina-1

• A Beclina-1 (também conhecida como proteína de miosina de cadeia enrolada interagindo com BCL2, ATG6 ou VPS30) é uma proteína central da autofagia codificada pelo gene BECN1.
• A Beclina-1 é uma proteína central da autofagia que funciona como uma subunidade central do complexo de PI3K de classe III, mediando a produção de fosfatidilinositol 3-fosfato. Referências relacionadas: PMID:18570871 PMID:21358617 PMID:23184933
• É essencial para a formação de complexos distintos de PI3K: PI3KC3-C1 para iniciação do autofagossomo e PI3KC3-C2 para maturação do autofagossomo e endocitose. Referências relacionadas: PMID:20208530 PMID:20643123 PMID:23974797
• A Beclina-1 está envolvida no tráfego endocítico e na etapa de abscisão da citocinese. Referências relacionadas: PMID:25275521
• Um fragmento mitocondrial de 35 kDa da Beclina-1 promove apoptose induzindo a translocação de BAX e a liberação de fatores pró-apoptóticos.
• Localiza-se em múltiplos organelos: citoplasma, Golgi, endossomos, retículo endoplasmático, mitocôndrias, autofagossomos e núcleo, consistente com seus papéis no tráfego de membranas.
• A Beclina-1 protege contra infecção pelo vírus Sindbis neurovirulento, indicando um papel na defesa antiviral.
• A Beclina-1 sofre várias modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação em Ser15, acetilação e ubiquitinação, que regulam suas funções.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético específico para Ser15 da Beclina-1 humana. Para confirmar a especificidade para fosforilação, considere amostras tratadas com fosfatase ou ensaios de competição com peptídeo em sua configuração experimental.
• Para Western blot, espera-se uma banda em torno de 52 kDa. Otimize usando géis de gradiente e condições de transferência adequadas para proteínas deste peso molecular.
• Para ELISA, o recobrimento direto do antígeno fosfopeptídico pode auxiliar na avaliação da ligação do anticorpo; otimize os tampões de recobrimento e condições de bloqueio para o seu formato de placa.
• É indicada reatividade cruzada com a Beclina-1 de camundongo e rato; assim, linhagens celulares ou lisados de tecidos dessas espécies podem ser usados para estudos funcionais de autofagia.
• A fosforilação da Beclina-1 pode ser transitória; inclua inibidores de fosfatase em tampões de lise e processe as amostras rapidamente para preservar o epítopo fosfo.

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