Anticorpo Policlonal de Coelho Phospho-Beclin 1 (Ser90) para WB e ELISA - Q14457

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Beclin-1

• Beclin-1 (ATG6/VPS30) é um componente central dos complexos de fosfatidilinositol 3-cinase classe III (PI3KC3), essencial para a autofagia e o tráfego de membranas. Referências relacionadas: PMID:18570871 PMID:21358617 PMID:23184933
• Ela regula etapas distintas da autofagia: o complexo PI3KC3-C1 inicia a formação do autofagossomo, enquanto o PI3KC3-C2 promove a maturação do autofagossomo e a endocitose. Referências relacionadas: PMID:20208530 PMID:20643123 PMID:23974797
• Beclin-1 participa do tráfego endocítico e é necessária para a etapa de abscisão da citocinese. Referências relacionadas: PMID:25275521
• Um fragmento C-terminal de 35 kDa de Beclin-1 se localiza nas mitocôndrias, promovendo a apoptose ao facilitar a translocação de BAX e a liberação de citocromo c.
• Subcelularmente, Beclin-1 é encontrada no citoplasma, aparelho de Golgi, rede trans-Golgi, endossomos, retículo endoplasmático, mitocôndrias, autofagossomos e núcleo, o que reflete seus papéis multifuncionais.
• Beclin-1 apresenta expressão tecidual ampla (ubíqua) e é regulada por várias modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação (por exemplo, em Ser90) e acetilação.
• Ela desempenha um papel na defesa antiviral do hospedeiro e protege contra infecção pelo vírus Sindbis neurotrópico.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético correspondente a Ser90 da Beclin-1 humana; portanto, espera-se que o anticorpo reconheça especificamente a forma fosforilada. Inclua inibidores de fosfatase nos tampões de lise para preservar a fosforilação.
• Para Western blot, o peso molecular previsto da Beclin-1 de comprimento completo é de ~52 kDa. Um fragmento clivado de ~35 kDa pode ser detectado sob condições de apoptose.
• Para ELISA, a detecção específica de fosforilação pode ser confirmada por ensaio de competição peptídica usando peptídeos não fosforilados e fosforilados.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato indica conservação do epítopo; no entanto, recomenda-se a validação no sistema experimental específico.

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