Anticorpo Policlonal de Coelho Phospho-BRD4-S498/S499 para WB, ELISA - O60885

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do BRD4

• O BRD4 é um leitor de cromatina que reconhece e se liga a histonas acetiladas, desempenhando um papel fundamental na transmissão da memória epigenética através das divisões celulares e na regulação da transcrição (PubMed:20871596, PubMed:23086925, PubMed:23317504). Referências relacionadas: PMID:20871596, PMID:23086925, PMID:23317504
• Permanece associado à cromatina acetilada durante todo o ciclo celular, fornecendo memória epigenética para a transcrição gênica pós-mitótica G1, preservando o estado da cromatina acetilada e mantendo a estrutura da cromatina (PubMed:22334664, PubMed:23317504, PubMed:23589332). Referências relacionadas: PMID:22334664, PMID:23317504, PMID:23589332
• Durante a interfase, o BRD4 regula a transcrição de genes indutíveis por sinal, associando-se ao complexo P-TEFb e recrutando-o para promotores e intensificadores, facilitando a fosforilação da RNA polimerase II (PubMed:16109376, PubMed:16109377, PubMed:19596240). Referências relacionadas: PMID:16109376, PMID:16109377, PMID:19596240
• Também atua como um isolador de cromatina na via de resposta a danos no DNA, inibindo a sinalização de danos no DNA ao recrutar o complexo condensina-2 para histonas acetiladas e limitar a propagação da fosforilação de H2AX.
• O BRD4 reconhece RELA acetilada, levando ao recrutamento de P-TEFb e ativação de NF-kappa-B (PubMed:19103749). Referências relacionadas: PMID:19103749
• Após a fosforilação por CK2, o BRD4 é recrutado para promotores alvo específicos de p53/TP53, regulando a transcrição mediada por p53 (PubMed:23317504). Referências relacionadas: PMID:23317504
• A localização subcelular é principalmente nuclear, associada aos cromossomos durante todo o ciclo celular.
• Expresso ubiquamente nos tecidos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi produzido contra um peptídeo fosforilado sintético em torno de S498 & S499 do BRD4 humano; portanto, prevê-se que reconheça especificamente a forma fosforilada do BRD4.
• Para Western blotting, considere o uso de inibidores de fosfatases durante a lise e trate as amostras com fosfatase alcalina para confirmar a detecção específica da fosforilação.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado para captura ou detecção de BRD4 fosforilado; o bloqueio apropriado com peptídeo pode aumentar a especificidade.
• Valide o desempenho do anticorpo em linhagens de células humanas ou tecidos relevantes que expressem BRD4, como células HeLa ou Jurkat, pois o BRD4 é expresso ubiquamente.

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