Phospho-BRD4-T204 Rabbit mAb para WB, ELISA - O60885

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do BRD4

• O BRD4 (proteína contendo domínio bromo 4, também conhecida como HUNK1) é uma proteína leitora de cromatina que reconhece e se liga a histonas acetiladas, desempenhando um papel fundamental na memória epigenética e na regulação da transcrição. Referências relacionadas: PMID:20871596, PMID:23086925, PMID:23317504
• Permanece associado à cromatina acetilada durante todo o ciclo celular, fornecendo memória epigenética para a transcrição de genes pós-mitóticos em G1, preservando a estrutura da cromatina. Referências relacionadas: PMID:22334664, PMID:23317504, PMID:23589332
• Durante a interfase, o BRD4 regula a transcrição de genes indutíveis por sinal, recrutando o complexo P-TEFb para promotores e intensificadores distais, frequentemente em colaboração com a JMJD6, deslocando reguladores negativos como HEXIM1 e 7SKsnRNA. Referências relacionadas: PMID:16109376, PMID:16109377, PMID:19596240
• O BRD4 também se liga à RELA acetilada, ativando a sinalização NF-kappa-B através do recrutamento do P-TEFb. Referências relacionadas: PMID:19103749
• Após a fosforilação pela CK2, o BRD4 é recrutado para os promotores alvo de p53/TP53, regulando a transcrição mediada por p53. Referências relacionadas: PMID:23317504
• Na resposta a danos no ADN, o BRD4 atua como um isolador de cromatina ao recrutar o complexo condensina-2, inibindo assim a sinalização de danos no ADN e limitando a propagação da fosforilação de H2AX.
• Ubiquamente expresso, o BRD4 localiza-se no núcleo e nos cromossomos, e sofre várias modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação e ubiquitinação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot (WB), utilize um protocolo padrão de SDS-PAGE com géis de 8% ou gradiente para resolver eficazmente a proteína BRD4 de ~152 kDa. Inclua inibidores de fosfatases nos tampões de lise para preservar a fosforilação em T204.
• Valide a especificidade do anticorpo testando a competição com peptídeo não fosforilado ou o tratamento com fosfatase.
• Para ELISA, considere o uso de peptídeos fosforilados e não fosforilados para avaliar a especificidade; otimize a concentração de revestimento.

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