pAb de Coelho Phospho-BRD4-T249 para WB - O60885

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da BRD4

• A BRD4 (proteína contendo bromodomínio 4, também conhecida como HUNK1) é um leitor de cromatina que reconhece e se liga a histonas acetiladas, desempenhando um papel fundamental na transmissão da memória epigenética através das divisões celulares e na regulação da transcrição. Referências relacionadas: PMID:20871596 PMID:23086925 PMID:23317504
• Ela permanece associada à cromatina acetilada durante todo o ciclo celular, preservando o status da cromatina acetilada e mantendo a estrutura da cromatina de ordem superior para a transcrição gênica G1 pós-mitótica. Referências relacionadas: PMID:22334664 PMID:23317504 PMID:23589332
• Durante a interfase, a BRD4 regula a transcrição de genes induzíveis por sinal, recrutando o complexo P-TEFb para promotores e intensificadores distais, facilitando a fosforilação do CTD da RNA polimerase II e o alongamento produtivo. Referências relacionadas: PMID:16109376 PMID:16109377 PMID:19596240
• A BRD4 liga-se à RELA acetilada para ativar a sinalização NF-kappa-B e, após a fosforilação por CK2, é recrutada para promotores alvo de p53/TP53 para regular a transcrição mediada por p53. Referências relacionadas: PMID:19103749 PMID:23317504
• Na resposta a danos no DNA, a BRD4 atua como um isolante de cromatina recrutando o complexo condensina-2 para histonas acetiladas, limitando a propagação da fosforilação da histona H2AX.
• Expressa de forma ubíqua e localizada no núcleo e na cromatina.
• Modificada pós-traducionalmente por acetilação e fosforilação; contém dois bromodomínios; envolvida em rearranjos cromossômicos ligados ao câncer; interage com proteínas virais.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético ao redor do Thr249 da BRD4 humana. Para confirmar a especificidade da fosforilação, considere usar um anticorpo BRD4 não específico para fosforilação como controle em experimentos paralelos.
• Para western blotting (WB), espera-se uma banda de aproximadamente 152 kDa. Use uma porcentagem de gel adequada (por exemplo, 8% de poliacrilamida) e otimize as condições de transferência para proteínas de alto peso molecular.
• Valide o anticorpo em uma linhagem celular relevante (por exemplo, HeLa, Jurkat) com status de fosforilação de BRD4 conhecido. Inclua coquetéis de inibidores de fosfatase nos tampões de lise para preservar os sinais de fosforilação.
• Como a reatividade cruzada é relatada para camundongo e rato, este anticorpo pode ser adequado para estudos em modelos de roedores; inclua controles positivos específicos da espécie apropriados para verificação.

CamelBio: Sua Ponte de Fornecimento Completa

A CamelBio atua como um parceiro confiável para fabricantes de diagnósticos, institutos de pesquisa e laboratórios, fornecendo uma gama abrangente de matérias-primas para IVD e suporte técnico. Para alvos de pesquisa epigenética, como a BRD4, oferecemos reagentes de anticorpos validados, incluindo clones específicos para fosforilação, pares de anticorpos correspondentes e suprimentos auxiliares a granel. Nossas robustas capacidades de fornecimento ajudam a otimizar seu fluxo de trabalho, desde o conceito até a clínica, garantindo acesso confiável a matérias-primas críticas de alta qualidade.