Anticorpo monoclonal de coelho Phospho-CDK1-T161+CDK2/CDK3-T160 para WB, IP, IF - P06493

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CDK1

• Ciclina-dependente quinase 1 (CDK1, também conhecida como CDC2/p34) é uma serina/treonina quinase altamente conservada que atua como regulador mestre do ciclo celular eucariótico, conduzindo a transição G2-M e coordenando a entrada e progressão mitótica (PubMed:16407259, PubMed:16933150, PubMed:17459720). Referências relacionadas: PMID:16407259 PMID:16933150 PMID:17459720
• A atividade da CDK1 é rigidamente controlada por ligação a ciclinas e fosforilação: a ativação requer a fosforilação de T161 pelo complexo quinase ativadora de CDK (CAK) (CDK7/ciclina H/MAT1), enquanto a fosforilação inibitória em T14 e Y15 é mediada por WEE1 e PKMYT1; a desfosforilação pelas fosfatases CDC25 na fronteira G2-M desencadeia a ativação repentina (PubMed:18480403, PubMed:20360007, PubMed:2188730). Referências relacionadas: PMID:18480403 PMID:20360007 PMID:2188730
• Uma vez ativada, a CDK1 fosforila mais de cem substratos a jusante para orquestrar eventos mitóticos, incluindo a fosforilação de laminas que leva à quebra do envelope nuclear, fosforilação de proteínas associadas a microtúbulos para montagem do fuso e fosforilação da histona H1 para condensação dos cromossomos (PubMed:2188730, PubMed:2344612, PubMed:37788673). Referências relacionadas: PMID:2188730 PMID:2344612 PMID:37788673
• Subcelularmente, a CDK1 se localiza dinamicamente no núcleo, citoplasma, mitocôndrias, centrossomos e fuso mitótico, refletindo seus diversos papéis funcionais durante a progressão do ciclo celular.
• A CDK1 também regula fatores de transcrição (por exemplo, FOXO1), proteínas apoptóticas (por exemplo, Bcl-xL, caspase 8) e modificadores epigenéticos (por exemplo, EZH2), ligando o controle do ciclo celular a decisões de destino celular e respostas a danos no DNA (PubMed:18356527, PubMed:19917720, PubMed:20937773, PubMed:20935635). Referências relacionadas: PMID:18356527 PMID:19917720 PMID:20937773 PMID:20935635
• A CDK1 é essencial para o desenvolvimento embrionário inicial e sua desregulação é frequentemente observada no câncer, onde pode estar superexpressa ou hiperativada, contribuindo para a proliferação descontrolada (PubMed:18480403, PubMed:20360007). Referências relacionadas: PMID:18480403 PMID:20360007
• Além disso, a CDK1 atua como receptor para a entrada do vírus da hepatite C (HCV) em hepatócitos, sugerindo um papel além da regulação do ciclo celular.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético direcionado a T161 fosforilada da CDK1 humana, um resíduo conservado na alça de ativação. Espera-se que o anticorpo reconheça a forma ativada (T161-fosforilada) da CDK1 e potencialmente tenha reatividade cruzada com T160 fosforilada de CDK2 e CDK3 devido à homologia de sequência.
• Para Western blotting, trate os lisados celulares com inibidores de fosfatases para preservar o estado de fosforilação. O peso molecular previsto é de ~34 kDa; monitore deslocamentos de banda ou alterações de intensidade após o tratamento com fosfatase para confirmar a fosfo-especificidade.
• Na imunoprecipitação, a pré-limpeza com um IgG de controle e o uso de condições de lise não desnaturantes podem melhorar a detecção de complexos de CDK1.
• Para imunofluorescência e imuno-histoquímica, os métodos de permeabilização e fixação devem ser otimizados; o anticorpo pode detectar padrões de coloração nuclear, citoplasmático e centrossomal dependendo da fase do ciclo celular.
• Aplicações de dot blot e ELISA podem ser usadas para triagem de alto rendimento dos níveis de fosfo-CDK1 em amostras.

CamelBio: Sua Ponte de Fornecimento Integrada

A CamelBio é dedicada a fornecer a fabricantes de diagnósticos, laboratórios e institutos de pesquisa um fornecimento integrado de matérias-primas para DVI, serviços técnicos e suporte de consultoria desde a concepção até a clínica. Nosso portfólio inclui pares de anticorpos validados, anticorpos monoclonais e policlonais otimizados, reagentes auxiliares a granel e fornecimento personalizado de alvos raros. Este anticorpo anti-fosfo-CDK1 suporta aplicações de pesquisa em ciclo celular e oncologia, e oferecemos soluções de aquisição flexíveis para acelerar seus fluxos de trabalho de desenvolvimento e fabricação.