Phospho-CDK1-Y15 Rabbit mAb para WB, ELISA - P06493

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CDK1

• A ciclina-dependente quinase 1 (CDK1), também conhecida como CDC2 ou proteína quinase p34, é uma serina/treonina proteína quinase que desempenha um papel fundamental no ciclo celular eucariótico, promovendo a transição G2-M e o início da mitose (PubMed:16407259, PubMed:16933150, PubMed:17459720). Referências relacionadas: PMID:16407259 PMID:16933150 PMID:17459720
• Fosforila uma ampla gama de substratos — incluindo lâminas, histona H1, tau e vimentina — para orquestrar a separação dos centrômeros, a quebra do envelope nuclear e a condensação dos cromossomos (PubMed:16407259, PubMed:16933150, PubMed:17459720, PubMed:18480403, PubMed:20360007, PubMed:2188730). Referências relacionadas: PMID:16407259 PMID:16933150 PMID:17459720 PMID:18480403 PMID:20360007 PMID:2188730
• A atividade do CDK1 é estritamente regulada por fosforilação/desfosforilação em Thr14 e Tyr15. A fosforilação em Tyr15 mediada por WEE1 e PKMYT1 inibe o CDK1, enquanto as fosfatases CDC25 removem este fosfato inibitório para impulsionar a entrada mitótica (PubMed:18480403, PubMed:20360007, PubMed:2188730, PubMed:20395957). Referências relacionadas: PMID:18480403 PMID:20360007 PMID:2188730 PMID:20395957
• Em resposta a danos no DNA, o CDK1 é fosforilado em Tyr15 e inibido, levando à prisão em G2 para reparo do DNA; a fosfatase WIP1 reativa o CDK1 após a conclusão do reparo (PubMed:20360007, PubMed:20395957). Referências relacionadas: PMID:20360007 PMID:20395957
• O CDK1 localiza-se no núcleo, citoplasma, mitocôndrias, centrômero e fuso, refletindo seus múltiplos papéis mitóticos.
• Encontrado em níveis elevados em tecidos de câncer de mama, tornando-se um alvo potencial para diagnóstico e terapia.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético que abrange a Tyr15 do CDK1 humano; portanto, o anticorpo reconhece especificamente a forma fosforilada.
• Para Western blotting, espere uma banda em ~34 kDa. Use inibidores de fosfatases no tampão de lise para preservar a fosforilação.
• A especificidade pode ser verificada tratando as amostras com fosfatase lambda ou realizando ensaios de competição de peptídeo com o peptídeo fosforilado e não fosforilado.
• Este anticorpo é validado para amostras humanas; a reatividade cruzada com outras espécies não foi determinada.
• Para ELISA, considere usar o fosfopeptídeo como antígeno de captura e um anticorpo CDK1 total como detecção para normalização.

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