Phospho-CDKN1B/p27KIP1-T187 Rabbit pAb para WB - P46527

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CDKN1B/p27KIP1

• A CDKN1B codifica o inibidor 1B da cinase dependente de ciclina, também conhecido como p27Kip1, um regulador crítico da progressão do ciclo celular.
• Inibe a atividade da cinase do CDK2 ligado à ciclina A, enquanto mostra pouco efeito nos complexos CDK2-SPDYA, e bloqueia potente a atividade da ciclina E- e ciclina A-CDK2, promovendo a prisão em G1. Referências relacionadas: PMID:28666995
• O p27Kip1 forma complexos com a ciclina D-CDK4 e modula a montagem e ativação do complexo CCND1-CDK4, atuando como inibidor ou ativador dependendo do estado de fosforilação.
• A nível subcelular, o p27 reside principalmente no núcleo, mas também pode localizar-se no citoplasma e nos endossomas, sendo a sua localização influenciadora das suas funções reguladoras.
• A expressão tecidual é ampla, com a proteína detetada em todos os tecidos testados; a expressão mais elevada é observada no músculo esquelético, enquanto níveis mais baixos são encontrados no fígado e no rim. Referências relacionadas: PMID:15509543, PMID:8033212
• O peso molecular previsto é de aproximadamente 22 kDa.
• O p27 é classificado como uma fosfoproteína com atividades de inibidor de proteína cinase e supressor tumoral, e sofre conjugação de ubiquitina, refletindo a sua rigorosa regulação pós-traducional.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Dado que este anticorpo é produzido contra um péptido específico de fosforilação circundante ao T187, é provável que detete a CDKN1B/p27KIP1 especificamente quando fosforilada neste resíduo. Valide a especificidade da fosforilação usando amostras tratadas com fosfatase ou mutantes não fosforiláveis.
• Para Western blot (WB), considere usar lisados de células ou tecidos frescos preparados com inibidores de fosfatase para preservar o sinal de fosforilação; espera-se uma banda perto de 22 kDa.
• Dada a expressão tecidual ubíqua, múltiplas linhagens de células humanas ou tipos de tecidos podem servir como controlos positivos; no entanto, a intensidade do sinal pode variar com o estado do ciclo celular.
• A natureza policlonal de coelho do anticorpo pode fornecer deteção robusta em várias condições desnaturantes e redutoras; otimize experimentalmente as condições de bloqueio e diluição.

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