Anticorpo Policlonal de Coelho Fosfo-Chk2-S516 - O96017

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Serina/treonina-proteína quinase Chk2

• Serina/treonina-proteína quinase que media a resposta a danos no DNA fosforilando efetores a jusante na sequência consenso [L-X-R-X-X-S/T], regulando a parada do ciclo celular, reparo do DNA e apoptose (PubMed:37943659).
  Referências relacionadas: PMID:37943659
• Controla pontos de verificação do ciclo celular fosforilando as fosfatases CDC25A, CDC25B e CDC25C, inibindo sua atividade e bloqueando a progressão do ciclo celular. Também fosforila NEK6 para impor a parada G2/M.
• Promove o reparo do DNA através da fosforilação de BRCA2, aumentando o recrutamento de RAD51 para recombinação homóloga, e ativa FOXM1 para estimular a transcrição de genes de reparo.
• Regula a apoptose fosforilando p53 na Ser-20 para aliviar a inibição por MDM2, levando à estabilização do p53; também fosforila MDM4 e PML para promover ainda mais a sinalização apoptótica.
• Exibe funções supressoras de tumor: mantém a estabilidade cromossômica via fosforilação de BRCA1 para montagem do fuso mitótico e está envolvido na inibição de SIRT1 mediada por CCAR2 (PubMed:25361978).
  Referências relacionadas: PMID:25361978
• Sob estresse oxidativo, promove a autofagia fosforilando TRIM32 na Ser-55, levando à ubiquitinação de ATG7 e aumento da montagem do autofagossomo (PubMed:37943659).
  Referências relacionadas: PMID:37943659
• Também implicado em interações hospedeiro-vírus: fosforila a proteína ICP0 do vírus herpes simplex, ativando sua atividade de ubiquitina ligase direcionada a SUMO.
• Localiza-se predominantemente no núcleo (incluindo corpos de PML e nucleoplasma) e é altamente expresso em testículo, baço, cólon e leucócitos do sangue periférico.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para preservar o sinal de fosforilação no western blot, inclua inibidores de fosfatase durante o preparo da amostra e considere induzir danos no DNA (por exemplo, por radiação ionizante ou drogas quimioterápicas) para aumentar a fosforilação da Ser516.
• Para aplicações de ELISA, valide o anticorpo com padrões de peptídeo fosforilado e controles apropriados; ele pode ser usado como reagente de captura ou de detecção.
• Reatividade cruzada com Chk2 de camundongo e rato foi relatada; valide a reatividade no seu sistema experimental específico usando lisados de tecido relevantes ou extratos de linhagem celular.
• Titular a concentração do anticorpo empiricamente para alcançar as melhores relações sinal-ruído na sua configuração de ensaio.

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