Anticorpo Policlonado de Coelho Phospho-Cyclina E1-T395 para WB, IF/ICC, ELISA - P24864

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Cyclina E1

• A Cyclina E1 é uma cyclina específica da fase G1/S, essencial para o controle do ciclo celular na transição G1/S. Ela forma complexos e ativa a quinase dependente de ciclina 2 (CDK2), impulsionando a progressão da fase G1 para a S.
• Ela pertence à família das cyclinas, um grupo de proteínas regulatórias que oscilam em concentração durante o ciclo celular e governam pontos de verificação chave.
• A proteína se localiza predominantemente no núcleo, o que é consistente com seu papel na regulação da transcrição e da maquinaria do ciclo celular.
• A expressão tecidual é mais alta no testículo e na placenta, com níveis baixos em células epiteliais brônquicas, refletindo sua função em tecidos em proliferação.
• As modificações pós-tradução incluem fosforilação em múltiplos resíduos (como T395), ubiquitinação e possível sumoilização, que modulam a estabilidade e a atividade da proteína.
• O splicing alternativo gera isoformas com regulação distinta e possivelmente funções específicas de tecido.
• O peso molecular calculado é de aproximadamente 47.077 Da (UniProt), o que é consistente com a banda observada de ~47 kDa em western blotting.
• As anotações do UniProt destacam o envolvimento na divisão celular, regulação de quinases dependentes de ciclina e identificação proteômica, ressaltando sua importância na proliferação celular normal e cancerígena.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopepídeo sintético ao redor da posição T395, tornando este anticorpo ideal para detectar especificamente a Cyclina E1 fosforilada neste resíduo. Para confirmar a fosfo-especificidade, considere tratar as amostras com λ-fosfatase ou usar bloqueio com peptídeo não fosforilado.
• Em western blotting, é esperada uma banda ao redor de 47 kDa; no entanto, valide o peso molecular no seu sistema de amostra específico, pois modificações pós-tradução podem alterar a migração.
• Para imunofluorescência/imunocitoquímica, é esperada coloração nuclear. Inclua DAPI ou outro contraste nuclear para verificar a localização e use condições adequadas de fixação/permeabilização para preservar os fosfoepitopos.
• Ao aplicar em ELISA, o anticorpo pode capturar ou detectar a Cyclina E1 fosforilada em lisados; otimize as etapas de revestimento e detecção para o formato do seu ensaio.
• A reatividade cruzada é reportada para humano, camundongo e rato; se usar outras espécies, realize o alinhamento de sequência ao redor de T395 e validação preliminar.

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