pAb de coelho Phospho-DNA-PKcs-S2056 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P78527

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da DNA-PKcs

• DNA-PKcs (PRKDC) atua como a subunidade catalítica do complexo de proteína quinase dependente de DNA, funcionando como um sensor molecular para danos no DNA e desempenhando um papel central no reparo por junção não homóloga de extremidades (NHEJ) de quebras de fita dupla e na recombinação V(D)J. Referências relacionadas: PMID:11955432 PMID:12649176 PMID:14734805
• Ele se localiza nas extremidades dos cromossomos, contribuindo para a manutenção da estabilidade telomérica e para a prevenção da fusão de extremidades cromossômicas.
• Além do reparo do DNA, a DNA-PKcs modula a transcrição, promove a biogênese de ribossomos processando o RNA pré-ribossômico e regula as respostas imunes inatas através da via cGAS-STING. Referências relacionadas: PMID:11955432 PMID:12649176 PMID:14734805 PMID:32103174 PMID:28712728 PMID:33273464 PMID:35460603
• Ela fosforila a Ser-139 da histona H2AX, um evento chave na resposta a danos no DNA, e inúmeros outros substratos incluindo p53, AKT, XRCC4 e WRN, influenciando assim a apoptose e a sinalização celular. Referências relacionadas: PMID:14627815 PMID:16046194 PMID:10026262 PMID:10467406 PMID:11889123 PMID:15262962
• Predominantemente uma proteína nuclear, a DNA-PKcs também é encontrada no nucléolo e no citosol, refletindo seus diversos papéis funcionais.
• Está sujeita a fosforilação, acetilação e ubiquitinação; mutações no PRKDC estão associadas à imunodeficiência combinada grave (SCID).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético que cobre a Ser2056 da DNA-PKcs humana, projetado para garantir especificidade do estado de fosforilação. Inclua controles fosfo-negativos adequados durante a validação.
• Para Western blot, devido ao peso molecular muito elevado da DNA-PKcs (469 kDa), considere usar géis de baixa porcentagem (ex: 4–8%) e tempos de transferência estendidos. Use marcadores pré-coloridos de alto peso molecular para uma visualização clara.
• Em imunofluorescência ou imuno-histoquímica, é esperada uma forte coloração nuclear, juntamente com possíveis sinais nucleolares e citoplasmáticos. Otimize os protocolos de fixação e permeabilização para preservar o fosfoepítopo.
• A reatividade cruzada é relatada para humanos; se testar outras espécies, confirme a homologia de sequência ao redor da Ser2056 e realize um teste piloto.

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