Anticorpo Policlonal de Coelho Phospho-EGFR-Y1068 para WB, IP, ELISA - P00533

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do EGFR

• O EGFR (ErbB-1/HER1) é um membro da família de receptores tirosina quinase ErbB que medeia a proliferação, sobrevivência e diferenciação celular após a ligação do ligando.
• A dimerização do receptor induzida por ligando desencadeia a autofosforilação em resíduos de tirosina citoplasmáticos, incluindo Y1068, criando locais de ancoragem para proteínas adaptadoras como GRB2, que ativam cascatas a jusante, incluindo RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCgamma-PKC e módulos STAT. Referências relacionadas: PMID:27153536
• O EGFR também sinaliza através da via NF-kappa-B e fosforila diretamente o RGS16 e o MUC1, modulando a atividade da GTPase e a adesão celular. Referências relacionadas: PMID:11116146, PMID:11602604, PMID:11483589
• A isoforma 2 pode atuar como um antagonista da ação do EGF.
• A localização subcelular inclui a membrana plasmática, endossomas, retículo endoplasmático, complexo de Golgi e núcleo, com uma forma secretada também relatada.
• O EGFR é ubiquamente expresso, com a isoforma 2 notavelmente encontrada em cancros ováricos.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação, glicosilação, metilação, hidroxilação, palmitoilação e ubiquitinação, típicas de um receptor de membrana altamente regulado.
• Para além da fisiologia normal, o EGFR serve como um receptor celular hospedeiro para a entrada do vírus da hepatite C (HCV).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para western blotting (WB), use coquetéis de inibidores de fosfatases durante a lise celular para preservar a fosforilação. É esperada uma banda específica perto de 134 kDa. Confirme a especificidade pré-incubando o anticorpo com o péptido imunogénio fosforilado ou tratando os lisados com fosfatase lambda.
• Para imunoprecipitação (IP) e ELISA, valide a especificidade fosfo usando controlos apropriados; o bloqueio com péptido não fosforilado ou o tratamento com fosfatase pode ajudar a diferenciar os sinais.
• A reatividade cruzada com camundongo garante a aplicabilidade em modelos de camundongo; valide no sistema de amostras relevante antes do uso extensivo.

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