PAb de Coelho para Phospho-EGFR-Y1086 para WB, ELISA - P00533

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do EGFR

• EGFR (Receptor do Fator de Crescimento Epidérmico), também denominado ErbB-1 ou HER1, é um membro da família ErbB de receptores tirosina quinases. É amplamente expresso em tecidos epiteliais e outros. Uma isoforma alternativa (isoforma 2) pode funcionar como antagonista da ação do EGF.
• O EGFR liga múltiplos ligandos da família EGF, incluindo EGF, TGF-α, amiregulina e epigen, levando à dimerização do receptor e autofosforilação em resíduos de tirosina citoplasmáticos. Referências relacionadas: PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960, PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• Após a ativação, o EGFR recruta proteínas adaptadoras e estimula as principais cascatas de sinalização como RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC e vias STAT, regulando a proliferação, sobrevivência e diferenciação. Referências relacionadas: PMID:27153536
• O EGFR também ativa a sinalização de NF-kappa-B e pode fosforilar diretamente proteínas substrato incluindo RGS16 (modulador de sinalização de proteína G), MUC1 (adesão celular/Wnt) e CCDC88A/GIV (promotor de migração), ligando sua atividade a diversos processos celulares. Referências relacionadas: PMID:11116146, PMID:11602604, PMID:11483589, PMID:20462955
• Subcelularmente, o EGFR está localizado principalmente na membrana celular, mas também é detectado no retículo endoplasmático, Golgi, núcleo, endossomos e pode ser secretado.
• Expresso ubiquitousmente nos tecidos humanos; a isoforma 2 é notavelmente expressa em cânceres de ovário.
• (Infecção microbiana) O EGFR atua como receptor de célula hospedeira para a entrada do vírus da hepatite C (HCV) nos hepatócitos, facilitando a formação do complexo receptor CD81-CLDN1.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno deste anticorpo é um fosfopeptídeo sintético ao redor de Y1086 do EGFR humano, projetado para reconhecer especificamente a forma fosforilada.
• Para Western blot, prepare lisados de linhas celulares humanas positivas para EGFR (ex.: A431 ou HeLa) com e sem estimulação por EGF; uma banda de ~134 kDa confirma a detecção.
• Para ELISA, use o anticorpo para capturar ou detectar o EGFR fosforilado em lisados de células humanas ou extratos de tecidos; otimize as condições de revestimento e detecção de acordo com a plataforma do seu ensaio.
• Certifique-se de incluir coquetéis de inibidores de fosfatase durante a lise e manipulação das amostras para preservar o sinal de fosforilação.
• Como a reatividade cruzada é restrita ao EGFR humano, valide o anticorpo nos seus sistemas de amostras humanas.

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