Anticorpo Policlonico de Coelho Phospho-EGFR (Y1148) para WB, ELISA - P00533

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do EGFR

• EGFR é uma receptor tirosina quinase que se liga aos ligantes da família EGF (EGF, TGF-alfa, AREG, epigen, betacelulina, epiregulina, HB-EGF) e desencadeia a dimerização do receptor e autofosforilação em resíduos de tirosina chave, incluindo Y1148. Referências relacionadas: PMID:10805725, PMID:27153536
• O EGFR autofosforilado serve como local de ancoragem para proteínas adaptadoras como GRB2, ativando cascatas de sinalização a jusante: módulos RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC e STAT. Ele também ativa NF-kappa-B e fosforila diretamente RGS16 e MUC1, acoplando-se às vias de proteína G e beta-catenina. Referências relacionadas: PMID:27153536, PMID:11116146, PMID:11602604, PMID:11483589
• EGFR regula positivamente a migração celular por meio da interação com CCDC88A/GIV, e contribui para o aprendizado, memória e sinalização da dor. Referências relacionadas: PMID:20462955
• A isoforma 2 pode atuar como antagonista da ação do EGF e também é expressa em cânceres de ovário; no geral, o EGFR é expresso de forma ubíqua.
• Subcelularmente, o EGFR reside na membrana celular, RE, Golgi, núcleo, endossomos e é secretado.
• Na infecção viral, o EGFR atua como receptor do vírus da hepatite C (HCV), mediando a entrada ao promover a formação do complexo CD81-CLDN1.
• Palavras-chave: receptor, tirosina-proteína quinase, proto-oncogene, fosfoproteína, glicoproteína; fundamental para a transdução de sinal e frequentemente desregulado no câncer.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blot, use um marcador de peso molecular adequado para 134 kDa e inclua lisados de controle positivo de linhagens celulares humanas estimuladas com EGF para confirmar a fosfoespecificidade.
• Verifique a dependência da fosforilação tratando as amostras com lambda fosfatase antes do immunoblotting; a perda de sinal confirma a ligação fosfoespecífica.
• Para ELISA, considere a cobertura com controles de peptídeo fosforilado e peptídeo não fosforilado para avaliar a reatividade cruzada; otimize a diluição do anticorpo e as condições de detecção.
• Como este anticorpo é policlonico de coelho, recomenda-se um anticorpo secundário anti-coelho conjugado a HRP; use bloqueio com BSA para minimizar a ligação não específica.

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