pAb de coelho Phospho-EGFR-Y1197 para WB - P00533

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Receptor do Fator de Crescimento Epidérmico (EGFR)

• EGFR é uma receptor tirosina quinase que se liga a ligantes da família EGF e ativa múltiplas cascatas de sinalização, regulando o crescimento, sobrevivência e diferenciação celular. Referências relacionadas: PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960
• A dimerização induzida por ligante leva à autofosforilação em tirosinas chave; a fosforilação em Y1197 cria um local de acoplamento para GRB2. Referências relacionadas: PMID:27153536
• EGFR ativado desencadeia pelo menos quatro vias principais: RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC e STATs. Referências relacionadas: PMID:27153536
• EGFR fosforila diretamente substratos como RGS16 e MUC1, modulando a sinalização de proteína G e a adesão celular. Referências relacionadas: PMID:11602604 PMID:11483589
• A interação com CCDC88A/GIV promove retenção membranar sustentada e migração celular. Referências relacionadas: PMID:20462955
• Uma isoforma alternativa (isoforma 2) pode atuar como antagonista da sinalização de EGF.
• EGFR encontra-se predominantemente na membrana plasmática, mas também é transportado para endossomos, Golgi, retículo endoplasmático e núcleo; existe uma forma secretada. É expresso ubiquitousamente, com a isoforma 2 também presente em cânceres de ovário.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, use coquetéis de inibidores de fosfatase durante a lise celular para preservar a fosforilação em Y1197.
• Valide a especificidade do anticorpo comparando lisados de células não tratadas versus estimuladas com EGF; espera-se um aumento substancial da intensidade da banda em torno de 134 kDa após a ativação.
• A proteína EGFR madura tem um peso molecular previsto de ~134 kDa, mas modificações pós-traducionais como a glicosilação podem causar uma mudança de mobilidade; use marcadores de peso molecular e controles positivos adequados.
• Como ponto de partida geral para anticorpos policlonados fosfoespecíficos, considere testar diluições entre 1:500 e 1:2000; otimize para suas condições experimentais específicas.

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