Anticorpo Policlonal de Coelho Phospho-EGFR-Y869 para WB e ELISA - P00533

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do EGFR

• EGFR é uma quinase de receptor tirosina que se liga a ligandos da família EGF (incluindo EGF, TGF-alfa, AREG, epigen, betacelulina, epiregulina e HBEGF), levando à dimerização do receptor e autofosforilação. Referências relacionadas: PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960 PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029

• EGFR ativado por ligando desencadeia múltiplas cascatas de sinalização intracelular, incluindo os módulos RAS-RAF-MEK-ERK, PI3 quinase-AKT, PLCgamma-PKC e STAT, além da sinalização NF-kappa-B. Referências relacionadas: PMID:27153536 PMID:11116146

• EGFR fosforila diretamente outras proteínas como RGS16 (aumentando sua atividade GTPase) e MUC1 (promovendo sua interação com SRC e beta-catenina), conectando às vias de proteína G e adesão celular. Referências relacionadas: PMID:11602604 PMID:11483589

• EGFR regula positivamente a migração celular ao interagir com CCDC88A/GIV, que retém o EGFR na membrana celular e mantém a sinalização. Referências relacionadas: PMID:20462955

• O gene EGFR (também conhecido como ERBB1, HER1) codifica uma quinase de receptor que pertence à família ERBB; uma isoforma de splicing alternativo (isoforma 2) pode atuar como antagonista da ação do EGF e é expressa em cânceres de ovário.

• EGFR está predominantemente localizado na membrana celular, mas também é detectado no retículo endoplasmático, aparelho de Golgi, membrana nuclear, endossomos e pode ser secretado.

• EGFR é uma fosfoproteína com sítios chave de fosforilação de tirosina (incluindo Y869) que regulam sua atividade quinase, e sofre glicosilação, ubiquitinação e outras modificações pós-traducionais.

• Expresso ubiquitariamente em tecidos humanos; EGFR atua como receptor celular do vírus da hepatite C (HCV), facilitando a entrada viral nos hepatócitos.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopepídeo sintético correspondente aos resíduos ao redor de Y869 do EGFR humano. Para confirmar a fosfo-especificidade, inclua controles tratados com fosfatase ou faça competição com peptídeo não fosforilado.
• Para western blot, use lisados de células estimuladas por EGF e espera uma banda em ~134 kDa; a reatividade cruzada com EGFR de camundongo e rato está descrita, mas valide para a espécie do seu interesse.
• Para ELISA, considere a cobertura com peptídeo fosforilado e otimize as condições de bloqueio e detecção para aumentar a relação sinal-ruído.
• Evite condições severas de stripping ao re-proteger blot, pois isso pode remover o sinal fosfo-específico.

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