pAb de coelho anti-Phospho-EGFR-Y998 para WB, ELISA - P00533

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do EGFR

• EGFR é um receptor tirosina quinase que se liga a ligantes da família EGF, ativando várias cascatas de sinalização para converter sinais extracelulares em respostas celulares adequadas.
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• Ligantes conhecidos incluem EGF, TGFA/TGF-alfa, AREG, epigen/EPGN, BTC/betacelulina, epiregulina/EREG e HBEGF/EGF de ligação à heparina.
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• A ligação do ligante triggera a homo- e heterodimerização do receptor e a autofosforilação em resíduos citoplasmáticos chave, que recruta proteínas adaptadoras como GRB2 e ativa cascatas a jusante incluindo os módulos RAS‑RAF‑MEK‑ERK, PI3K‑AKT, PLCgamma‑PKC e STAT.
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• O EGFR também pode ativar a cascata de sinalização NF‑kappa‑B e fosforilar diretamente outras proteínas como RGS16 e MUC1, ligando sua sinalização às vias de receptores acoplados à proteína G e interações com beta-catenina.
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• O EGFR regula positivamente a migração celular por meio da interação com CCDC88A/GIV, que retém o EGFR na membrana e promove a sinalização que desencadeia a migração celular.
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• O EGFR se localiza na membrana celular, membrana do retículo endoplasmático, membrana do aparelho de Golgi, membrana nuclear, membrana do endossomo e núcleo, e uma forma secretada já foi identificada.

• É expresso de forma ubíqua nos tecidos humanos; a isoforma 2 também é expressa em cânceres de ovário e pode atuar como antagonista da ação do EGF.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo policlonal de coelho foi produzido contra um peptídeo fosforilado sintético correspondente aos resíduos ao redor de Y998 do EGFR humano. Espera-se que ele reconheça a forma fosforilada do EGFR neste sítio.
• Para Western blot (WB), prevê-se uma banda de aproximadamente 134 kDa para a proteína EGFR de comprimento total. Considere o uso de inibidores de fosfatase adequados durante a preparação da amostra para preservar a fosforilação.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado para detectar EGFR fosforilado; considere usar um peptídeo não fosforilado como controle negativo para confirmar a fosfo-especificidade.
• O anticorpo é validado para amostras humanas. A reatividade cruzada com outras espécies não foi determinada; se aplicado a outras espécies, valide experimentalmente.
• Como qualquer anticorpo fosfo-específico, a consistência entre lotes e as diluições de trabalho ideais devem ser determinadas empiricamente no sistema de amostra relevante.

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