Phospho-eIF4E-S209 Coelho pAb - P06730

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do eIF4E

• O fator de iniciação da tradução eucariótica 4E (eIF4E), também conhecido como subunidade de 25 kDa do eIF-4F e proteína de ligação à capa do mRNA, é um regulador chave da síntese proteica.
• Reconhece e se liga à capa de 7-metilguanosina (m7G) do mRNA, induzindo o desempacotamento de estruturas secundárias para facilitar a ligação do ribossomo durante a iniciação da tradução (PubMed:16271312, PubMed:22578813).
  Referências relacionadas: PMID:16271312 PMID:22578813
• Atua no núcleo para promover a exportação de um subconjunto de mRNAs, estimulando a capagem, processamento e splicing do RNA (PubMed:11606200, PubMed:22578813, PubMed:22684010).
  Referências relacionadas: PMID:11606200 PMID:22578813 PMID:22684010
• Junto com o EIF4G1, antagoniza a varredura ribossômica e é necessário para a tradução dependente do elemento TISU (Iniciador de Tradução de UTR 5' curto), que dispensa a varredura (PubMed:29987188).
  Referências relacionadas: PMID:29987188
• No citoplasma, regula a tradução e a estabilidade do mRNA; nos corpos P, medeia o armazenamento de mRNAs inativos para tradução, evitando sua degradação (PubMed:24335285).
  Referências relacionadas: PMID:24335285
• Promove a exportação nuclear de mRNAs específicos, incluindo NOS2/iNOS (PubMed:23471078) e MDM2 (PubMed:22684010), influenciando as respostas imunes e o controle do ciclo celular.
  Referências relacionadas: PMID:23471078 PMID:22684010
• Se localiza no citoplasma, corpos P, grânulos de estresse, núcleo, speckles nucleares e corpos nucleares, refletindo seus papéis multifacetados.
• É modificado pós-traducionalmente por fosforilação e acetilação; a desregulação do eIF4E está ligada a transtornos do espectro autista e é explorada por vírus para a síntese proteica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético ao redor da S209; verifique a especificidade com tratamento com fosfatase ou competição com peptídeo não fosforilado no seu sistema de ensaio.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de ~25 kDa; otimize as condições de eletroforese e transferência, e considere o uso de membranas de baixa fluorescência para reduzir o fundo.
• No ELISA, pareie este anticorpo com um anticorpo anti-eIF4E total para quantificar os níveis de fosforilação; valide a linearidade e a sensibilidade na matriz da sua amostra.
• A reatividade cruzada é reportada para humano e camundongo; teste em lisados da sua espécie de interesse e ajuste a diluição do anticorpo conforme necessário.
• Para detecção fosfo-específica, certifique-se de que as amostras foram preparadas com inibidores de fosfatase para preservar o estado de modificação.

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