Anticorpo Policlonal Fosfo-eIF4EBP1 (T37/T46) para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q13541

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do eIF4EBP1

• eIF4EBP1, também conhecido como PHAS-I ou 4E-BP1, é um repressor da tradução que se liga à proteína de ligação ao cap de mRNA eIF4E.
• Em seu estado hipofosforilado, o eIF4EBP1 inibe competitivamente a interação entre eIF4E e eIF4G, impedindo assim a montagem do complexo de iniciação da tradução eIF4F.
• A hiperfosforilação do eIF4EBP1, desencadeada por fatores de crescimento e hormônios via vias da quinase MAP e mTORC1, causa sua dissociação do eIF4E, permitindo que a tradução dependente do cap prossiga.
• eIF4EBP1 é um mediador chave do controle translacional em resposta a estímulos extracelulares, integrando sinais que regulam o crescimento e a proliferação celular.
• A proteína se localiza tanto no citoplasma quanto no núcleo, onde pode desempenhar papéis na exportação nuclear do eIF4E ou na tradução nuclear.
• O eIF4EBP1 sofre múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação em vários sítios (por exemplo, T37, T46), acetilação e conjugação do tipo ubiquitina, que ajustam finamente sua atividade.
• Ele pertence a uma família de proteínas de ligação ao eIF4E que compartilham um motivo conservado de ligação ao eIF4E.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como o anticorpo tem como alvo a fosforilação em T37/T46, inclua inibidores de fosfatase nos tampões de lise celular/tecidual para manter o sinal de fosforilação.
• Para Western blotting, o peso molecular esperado do eIF4EBP1 é de aproximadamente 13 kDa, mas múltiplas bandas correspondentes a diferentes estados de fosforilação podem ser observadas.
• Para imuno-histoquímica e imunofluorescência, otimize os métodos de recuperação de antígeno e a diluição do anticorpo para o seu tipo específico de amostra.
• Valide a especificidade do anticorpo usando controles positivos apropriados (por exemplo, células tratadas com insulina ou soro) e controles negativos (por exemplo, lisados tratados com fosfatase ou bloqueio com peptídeo não fosforilado).
• O anticorpo é adequado para múltiplas aplicações (WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA); considere as faixas de detecção recomendadas para cada técnica.

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