Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Phospho-ERK1-T202 + ERK2-T185 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P28482 / P27361

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de ERK1/ERK2

• ERK2 (MAPK1, também conhecida como p42-MAPK) e ERK1 (MAPK3, p44-MAPK) são as duas principais quinases ativadas por mitógenos que constituem o núcleo da cascata de sinalização MAPK/ERK, transduzindo sinais extracelulares para regular o destino celular.
• A via MAPK/ERK controla um amplo espectro de processos celulares, incluindo proliferação, diferenciação, adesão, sobrevivência e apoptose, ao fosforilar mais de 160 substratos a jusante, como fatores de transcrição (ex.: ELK1, FOS, ATF2), quinases de proteínas (ex.: RSK, MSK, MNK) e reguladores do citoesqueleto.
• Após ativação, ERK1/2 fosforila GLI1 para promover sua dissociação de SUFU e translocação nuclear, modulando positivamente a sinalização smoothened.
  Referências relacionadas: PMID:35831023
• Em resposta à hipóxia, ERK2 fosforila a fosfoglicerato quinase PGK1, direcionando-a para a mitocôndria para suprimir a produção de acetil-CoA a partir do piruvato.
  Referências relacionadas: PMID:26942675
• A quinase localiza-se em múltiplos compartimentos subcelulares: citoplasma, núcleo, citoesqueleto (fuso, centrossomo), adesões focais e caveolas da membrana, permitindo sinalização dependente do contexto.
• A ativação requer fosforilação dupla no motivo Thr-Glu-Tyr (T185 e Y187 em ERK2; T202 e Y204 em ERK1) pelas quinases MEK a montante; este anticorpo detecta especificamente a fosforilação em T185 (ERK2) e T202 (ERK1).
• Além da atividade quinase, ERK2 também funciona como um repressor transcricional ao ligar-se a elementos promotores ricos em GC independentemente de sua atividade catalítica, modulando genes responsivos ao interferon.
• Palavras-chave: Acetilação, Splicing alternativo, Apoptose, Ligação a ATP, Ciclo celular, Junção celular, Citoplasma, Citoesqueleto, Ligação a DNA, Interação hospedeiro-vírus, Quinase, Membrana, Ligação a nucleotídeos, Núcleo, Fosfoproteína, Repressor, Serina/treonina-proteína quinase, Transcrição, Regulação da transcrição, Conjugação Ubl.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para preservar a fosforilação durante o preparo da amostra, inclua inibidores de fosfatase nos tampões de lise e evite manuseio prolongado da amostra em temperatura ambiente.
• Valide a especificidade do anticorpo tratando lisados celulares com fosfatase lambda de proteína; espere perda completa do sinal no Western blot.
• Em IHC-P, otimize as condições de recuperação antigênica (ex.: tampão citrato pH 6.0) e considere usar um protocolo de amplificação de sinal fosfo‑específico para melhorar a detecção de alvos fosforilados de baixa abundância.
• Para IF/ICC, fixe as células com formaldeído e permeabilize com metanol; confirme a colocalização com marcadores subcelulares conhecidos (ex.: DAPI nuclear, marcadores do Golgi) com base na localização esperada após estimulação.
• Bandas esperadas: ~38–43 kDa para isoformas de ERK1/ERK2; múltiplas bandas podem aparecer devido a estados de fosforilação ou variantes de splicing.

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