mAb de coelho contra Phospho-ERK1 (T202/Y204) + ERK2 (T185/Y187) para WB, IHC-P, ELISA - P27361/P28482

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de ERK1/2

• A proteína quinase ativada por mitógeno 3 (MAPK3/ERK1) é uma serina/treonina quinase que atua como componente essencial da via de transdução de sinal MAP quinase, mediando diversas funções biológicas como crescimento celular, adesão, sobrevivência e diferenciação. Referências relacionadas: PMID:34497368
• ERK1 fosforila mais de 160 substratos conhecidos localizados no núcleo (por exemplo, fatores de transcrição ATF2, ELK1, FOS) e no citosol (por exemplo, elementos citoesqueléticos, reguladores da apoptose e da tradução), permitindo um amplo controle sobre a transcrição, tradução e apoptose. Referências relacionadas: PMID:35216969
• Em células em repouso, ERK1 é predominantemente citoplasmática, mas após estimulação transloca para o núcleo. Ela também se localiza em caveolas de membrana, junções celulares e adesões focais, destacando seus papéis na integração de sinais e reorganização do citoesqueleto.
• A cascata MAPK/ERK, incluindo ERK1, está envolvida na regulação da dinâmica endossomal, processamento de lisossomos, ciclo de endossomos através do compartimento de reciclagem perinuclear (PNRC) e fragmentação do aparelho de Golgi durante a mitose.
• ERK1 sofre múltiplas modificações pós-traducionais incluindo fosforilação (Thr-202/Tyr-204), acetilação e ubiquitinação, e está implicada no controle do ciclo celular, interações hospedeiro-vírus e apoptose.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Baseado no imunógeno de fosfopeptídeo sintético ao redor de T202/Y204 da ERK1 humana, este anticorpo é projetado para reconhecer a forma ativa duplamente fosforilada de ERK1 e reage cruzadamente com os sítios fosforilados correspondentes (T185/Y187) em ERK2 devido à alta homologia de sequência. Inclua inibidores de fosfatase durante a preparação da amostra para preservar a fosforilação.
• Para Western Blot, espere uma banda em ~42–44 kDa. Para manter a integridade do sinal fosfo, use tampões de stripping suaves ou prepare amostras frescas para sondagens repetidas, em vez de stripping rigoroso.
• Em IHC-P, pode ser aplicada a recuperação de antígeno padrão (por exemplo, tampão de citrato, pH 6,0). Inclua controles de tecido estimulado e não estimulado para confirmar a fosfo-especificidade.
• Para ELISA, um formato sanduíche usando um anticorpo de captura pan-ERK pareado com este anticorpo de detecção pode quantificar ERK1/2 ativo em lisados ou homogeneizados.

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