Anticorpo Policlonal de Coelho Phospho-ESRα-S167 para WB, IF/ICC, ELISA - P03372

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Receptor de Estrogênio Alfa

• O receptor de estrogênio alfa (ER-alpha), codificado pelo gene ESR1, é um receptor de hormônio esteróide e membro da subfamília 3 grupo A de receptores nucleares (NR3A1). Funciona como um fator de transcrição ativado por ligante, regulando a expressão gênica crítica para a proliferação e diferenciação celular em tecidos alvo.
• Após a ligação do estrogênio, o ER-alpha sofre uma mudança conformacional que facilita a homodimerização e a ligação aos elementos de resposta ao estrogênio (EREs) no DNA. Também interage com outros fatores de transcrição, como AP-1 (c-Jun/c-Fos) e Sp1, para mediar a sinalização independente de ERE. Complexos de coativadores são recrutados através de motivos LXXLL.
• O splicing alternativo e o uso de promotores produzem isoformas que carecem de um ou mais domínios funcionais. Essas isoformas podem modular a atividade transcricional do receptor de comprimento total por ligação competitiva de DNA ou ligante, ou por heterodimerização. Referências relacionadas: PMID:10970861
• O ER-alpha transita entre o núcleo, citoplasma e membrana celular. Também está associado ao aparelho de Golgi, permitindo vias de sinalização genômica e rápida não genômica, incluindo a ativação de cascatas de quinases.
• O receptor está sujeito a múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, glicosilação, palmitoilação e conjugação tipo ubiquitina. Contém motivos de dedo de zinco e um domínio de ligação ao ligante, com um peso molecular de aproximadamente 66 kDa.
• O ER-alpha é amplamente expresso em tecidos humanos, mas notavelmente ausente na glândula pituitária. Referências relacionadas: PMID:10970861
• Papéis funcionais específicos incluem manter a sobrevivência neuronal sob lesão de reperfusão isquêmica na presença de estradiol e ativar o NOS3 para promover a produção de óxido nítrico endotelial. Referências relacionadas: PMID:21937726
• O ER-alpha também participa da transrepressão mútua com NF-kappa-B, modulando respostas inflamatórias. Além disso, medeia a regulação transcricional dependente de MTA1 de BRCA1 e BCAS3. Referências relacionadas: PMID:17922032

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um peptídeo sintético fosforilado ao redor da Ser167. Use inibidores de fosfatase durante o preparo da amostra para preservar a fosforilação.
• Para western blotting, o tamanho previsto da banda é de ~66 kDa. Valide a detecção em linhagens de células humanas conhecidas por expressar ER-alpha, como MCF-7.
• Em imunofluorescência/ICC, antecipe a localização nuclear, citoplasmática e de membrana. Realize coloração simultânea com marcadores de compartimento para confirmar a especificidade.
• Como um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes pode variar; inclua controles positivos e negativos e considere um peptídeo de bloqueio para verificação de especificidade fosfo.
• Embora o anticorpo seja reativo com amostras humanas, a reatividade cruzada com outras espécies não foi testada; a validação empírica é recomendada se usado ortologicamente.
• Para ELISA, um antígeno de revestimento de peptídeo fosforilado pode ajudar a calibrar a sensibilidade de detecção.

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