Anticorpo Policlonal de Coelho Fosfo-EZH2/KMT6 (T311) para WB, ELISA - Q15910

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da EZH2

• A EZH2 é uma histona-lisina N-metiltransferase, também conhecida como enhancer of zeste homolog 2, ENX-1 ou KMT6, e funciona como a subunidade catalítica do complexo PRC2.
• O complexo PRC2/EED-EZH2 metila a histona H3 na Lis-9 e Lis-27, levando à repressão transcricional de genes alvo. Referências relacionadas: PMID:14532106, PMID:15225548, PMID:15385962
• A EZH2 mono-, di- e trimetila H3K27, com preferência por substrato não metilado (H3K27me0) e atividade progressivamente menor em H3K27me1 e H3K27me2. Referências relacionadas: PMID:15231737, PMID:17210787, PMID:18285464, PMID:22323599, PMID:30923826
• Em células-tronco embrionárias, a EZH2 é mais abundante que a EZH1 e é essencial para estabelecer as marcas H3K27me3 necessárias para a identidade das células-tronco e diferenciação adequada. Referências relacionadas: PMID:19026781
• O complexo PRC2 pode recrutar DNA metiltransferases, ligando a metilação de histonas à metilação do DNA e reforçando o silenciamento gênico. Referências relacionadas: PMID:16357870, PMID:17200670
• Genes alvo conhecidos reprimidos por EZH2/PRC2 incluem HOXC8, HOXA9, MYT1, CDKN2A e genes responsivos ao ácido retinoico. Referências relacionadas: PMID:16179254, PMID:18086877, PMID:20935635
• A EZH2 também metila proteínas não histônicas, como o fator de transcrição GATA4 e o receptor nuclear RORA, expandindo seu escopo regulatório. Referências relacionadas: PMID:23063525
• Ela regula os ritmos circadianos metilando a histona H3 em promotores de genes do relógio, facilitando a repressão mediada por CRY1/2 da transcrição de PER1/2.
• A EZH2 está predominantemente localizada no núcleo e é amplamente expressa em muitos tecidos; a superexpressão é frequentemente observada em cânceres de mama, cólon, laringe, linfoma e testicular. Referências relacionadas: PMID:14532106
• A EZH2 é uma fosfoproteína, e a fosforilação no resíduo Thr311 é uma das modificações pós-traducionais que podem regular sua atividade.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno usado para gerar este anticorpo é um peptídeo sintético carregando fosforilação na Thr311; portanto, espera-se que o anticorpo reconheça especificamente a forma fosforilada da EZH2 neste sítio. Confirme a especificidade comparando sinais em amostras tratadas com fosfatase versus não tratadas.
• Para western blot (WB), a EZH2 migra a ~85kDa. Use controles positivos apropriados, como células HEK293T ou HeLa, e valide a detecção da forma fosfo-T311 sob condições que induzam a fosforilação da EZH2.
• O ELISA pode ser empregado para análise quantitativa dos níveis de fosfo-EZH2 (T311); considere usar um anticorpo de captura em combinação com este pAb para ELISA sanduíche.
• Foi observada reatividade cruzada com rato; portanto, este anticorpo pode ser adequado para estudos em modelos de roedores. Valide no sistema de tecido ou linhagem celular relevante para garantir a especificidade.

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