Anticorpo Policlonal de Coelho Phospho-FAK-Y576/577 para WB, ELISA - Q05397

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do FAK

• A quinase de adesão focal 1 (FAK, PTK2) é uma proteína-tirosina quinase não recetora que regula a migração celular, adesão, espalhamento e reorganização do citoesqueleto de actina.
• O FAK desempenha papéis essenciais no desenvolvimento embrionário, angiogénese, migração de cardiomiócitos e desenvolvimento do sistema nervoso.
• O isoforma 1 de comprimento total medeia a sinalização de integrinas, recetores de fatores de crescimento e GPCRs, ativando as vias PI3K/AKT e MAPK.
• O isoforma 6 (FRNK) carece do domínio da quinase e funciona como um inibidor dominante-negativo da fosforilação e sinalização do FAK.
• O FAK localiza-se nas adesões focais, membrana celular, citoplasma, centrossomos e núcleo, indicando trânsito dinâmico.
• A fosforilação em Tyr576 e Tyr577 na alça de ativação do domínio da quinase é crítica para a atividade catalítica do FAK.
• O FAK fosforila substratos a jusante como NEDD9 (PubMed:9360983) e SRC para promover a montagem de complexos de sinalização. Referências relacionadas: PMID:9360983
• Expressão ubíqua; detetada em linfócitos B/T, fibroblastos pulmonares e células epiteliais (PubMed:31630787). Referências relacionadas: PMID:31630787

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um fosfopeptídeo sintético que abrange Tyr576/Tyr577; a especificidade do anticorpo depende do estado de fosforilação.
• Inclua inibidores de fosfatases nos tampões de lise para preservar os epítopos fosforilados durante a preparação da amostra.
• Para Western blot, espera-se uma banda principal em ~119 kDa; bandas adicionais podem representar degradação ou reatividade cruzada.
• Valide a deteção em linhas celulares ativadas (por exemplo, fibroblastos estimulados por integrinas) onde a fosforilação do FAK Y576/577 é induzida.
• Para ELISA, considere revestir com o imunogénio fosfopeptídeo ou usar lisados de células inteiras; inclua peptídeo não fosforilado como controlo negativo.

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