pAb de Coelho Anti-Fosfo-FGFR3-Y724 - P22607

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do FGFR3

• Codificado pelo gene FGFR3 (também conhecido como JTK4), o receptor 3 do fator de crescimento de fibroblastos é uma tirosina quinase transmembrana que atua como um receptor de superfície celular para fatores de crescimento de fibroblastos.
• Desempenha um papel crítico na regulação da diferenciação, proliferação e apoptose de condrócitos, sendo essencial para o desenvolvimento esquelético normal e a mineralização óssea pós-natal.
• A ligação do ligante desencadeia a ativação de múltiplas vias de sinalização a jusante, incluindo PLCG1, levando à produção de DAG e IP3, e ao recrutamento mediado por FRS2 de GRB2, GAB1, PIK3R1 e SOS1, resultando na ativação das vias RAS-MAPK e AKT1.
• Mutações que causam ativação constitutiva da quinase ou comprometem a maturação, internalização e degradação do receptor levam a uma sinalização aberrante e estão associadas a displasias esqueléticas e cânceres; a isoforma secretada 3 pode interferir na sinalização de FGF.
• A localização subcelular inclui a membrana celular, vesículas citoplasmáticas, retículo endoplasmático e uma forma secretada; a expressão é detectada no cérebro, rim e testículo, com alta expressão fetal no rim, pulmão, intestino delgado e cérebro.
• A isoforma 2 é predominantemente detectada em células epiteliais, enquanto as isoformas 1 e 2 são encontradas em células fibroblásticas; a proteína sofre splicing alternativo e glicosilação ligada a N.
• Classificado como uma fosfoproteína e receptor tirosina quinase, o FGFR3 está implicado em doenças como craniossinostose, surdez, nanismo e displasia ectodérmica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de aproximadamente 88 kDa; considere usar uma porcentagem de gel apropriada (por exemplo, 8–10% SDS-PAGE) e otimizar as condições de transferência. Valide a detecção em seu sistema de amostra, pois modificações pós-traducionais e isoformas podem causar deslocamentos de mobilidade.
• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético correspondente à Tyr724 do FGFR3 humano; para confirmar a especificidade da fosforilação, inclua o tratamento com lambda fosfatase ou use um controle de bloqueio com peptídeo não fosforilado em ELISA.
• Este anticorpo apresenta reatividade cruzada com FGFR3 humano e de camundongo; verifique a reatividade em outras espécies antes do uso.
• Para ELISA, otimize a concentração do antígeno de revestimento e a diluição do anticorpo usando o peptídeo fosforilado como controle positivo. Considere um protocolo de ELISA indireto padrão.

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