Anticorpo Policlonal de Coelho Fosfo-FOXO3A-S425 para WB, IHC-P, ELISA - O43524

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína Forkhead box O3

• Forkhead box protein O3 (FOXO3A), também conhecida como proteína AF6q21 ou Forkhead in rhabdomyosarcoma-like 1 (FKHRL1), é um fator de transcrição expresso de forma ubíqua codificado pelo gene FOXO3 (ID do gene humano 2309).
• FOXO3A atua como um ativador transcricional que reconhece o consenso de DNA 5'-[AG]TAAA[TC]A-3', regulando processos-chave como apoptose e autofagia. Referências relacionadas: PMID:10102273, PMID:16751106, PMID:21329882
• Em resposta à privação de nutrientes, FOXO3A entra no núcleo após desfosforilação e regula positivamente genes de autofagia (ex.: GABARAP1L, MAP1LC3B, ATG12), promovendo a degradação de proteínas do músculo esquelético.
• FOXO3A desencadeia apoptose na ausência de fatores de sobrevivência, causando notavelmente morte de células neuronais sob estresse oxidativo. Referências relacionadas: PMID:10102273, PMID:16751106
• Após fosforilação por MAPKAPK5, FOXO3A induz miR-34b e miR-34c, que suprimem pós-transcricionalmente a expressão do oncogene MYC. Referências relacionadas: PMID:21329882
• FOXO3A se desloca entre o citoplasma e o núcleo, e sob estresse metabólico transloca para a matriz mitocondrial e membrana externa para aumentar a transcrição do mtDNA. Referências relacionadas: PMID:23283301
• Modificações pós-traducionais-chave incluem fosforilação (ex.: na Ser425), acetilação, metilação e ubiquitinação, que governam sua atividade, localização e estabilidade.
• FOXO3A está envolvido na diferenciação de células T reguladoras ao ativar a expressão de FOXP3, e no comprometimento condrogênico de progenitores esqueléticos sob condições de baixo lipídio. Referências relacionadas: PMID:30513302

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético em torno da serina 425; para preservar esta modificação lábil, adicione inibidores de fosfatase durante o preparo da amostra.
• Para Western blot (WB), considere carregar um controle positivo, como lisado de células tratadas com um indutor da fosforilação de FOXO3A (ex.: estresse oxidativo ou privação de soro) e valide a especificidade da banda com uma amostra tratada com fosfatase.
• Imunohistoquímica (IHC‑P) pode exigir otimização de recuperação antigênica; inclua uma etapa de bloqueio com considerações fosfo-específicas para reduzir ligação inespecífica.
• Protocolos de ELISA devem usar as condições de revestimento recomendadas e incluir uma curva padrão; a reatividade cruzada entre humano, camundongo e rato sugere que o epítopo é conservado, mas sempre confirme o desempenho na sua matriz de interesse.
• O peso molecular da proteína é aproximadamente 71 kDa; verifique a detecção no tamanho esperado e considere um possível deslocamento devido a modificações pós‑traducionais.

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