Anticorpo Policlonal de Coelho Fosfo-FOXO4-S197 para WB, IF/ICC, ELISA - P98177

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da FOXO4

• Forkhead box protein O4 (FOXO4), também conhecida como AFX, AFX1 ou MLLT7, é um fator de transcrição da família forkhead.
• FOXO4 liga-se a elementos de resposta à insulina (IREs) e regula a via de sinalização da insulina ativando a transcrição de alvos como IGFBP1.
• Funciona como um regulador negativo do ciclo celular e está envolvida na diferenciação celular e processos de desenvolvimento.
• FOXO4 regula negativamente a expressão de HIF1A e suprime a ativação transcricional induzida por hipóxia, ligando-a a vias de detecção de oxigênio.
• Em células-tronco embrionárias, FOXO4 aumenta a atividade do proteassoma ao regular positivamente PSMD11, promovendo a montagem do proteassoma 26S.
• A proteína localiza-se tanto no citoplasma quanto no núcleo, com o transporte nucleocitoplasmático regulado por fosforilação.
• FOXO4 é amplamente expressa, com níveis mais altos em coração, cérebro, placenta, pulmão, fígado, músculo esquelético, rim e pâncreas; a isoforma zeta predomina no fígado, rim e pâncreas.
• Modificações pós-traducionais importantes incluem fosforilação (por exemplo, em Ser197), acetilação e ubiquitinação, que modulam sua atividade e estabilidade.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético abrangendo Ser197; para detecção fosfo-específica, considere tratar amostras com fosfatase lambda para confirmar a especificidade do sinal.
• Para Western blot, espera-se uma banda em torno de 54 kDa; verifique em lisados de tecidos com expressão conhecida de FOXO4, como fígado ou rim.
• Em imunofluorescência/ICC, monitore o transporte nuclear-citoplasmático sob diferentes estímulos; estimulação com insulina ou fatores de crescimento pode alterar a localização.
• Ao usar ELISA, recubra com o fosfopeptídeo e compare com o peptídeo não fosforilado para avaliar a fosfo-seletividade do anticorpo.
• Reatividade cruzada com FOXO4 endógeno de camundongo e rato é relatada; valide no contexto da espécie e tecido relevantes.

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