Anticorpo Policlonal de Coelho Phospho-GAB1 (Tyr659) para WB, ELISA - Q13480

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína de Ligação Associada ao GRB2 1

• GAB1 (proteína de ligação associada ao GRB2 1) é uma proteína adaptadora de andaime que medeia a sinalização a jusante de múltiplas tirosina quinases de receptor.
• Participa de cascatas de sinalização intracelular desencadeadas por receptores ativados, como FGFR1, EGFR e INSR.
• Especificamente envolvido na via de sinalização MET/HGF. Referências relacionadas: PMID:29408807
• Membro da família de adaptadores GAB, compartilhando motivos estruturais como um domínio de homologia de pleckstrina e múltiplos sítios de fosforilação de tirosina que recrutam proteínas contendo domínio SH2.
• Fosforilado intensamente em resíduos de tirosina (incluindo Y659) após a ativação do receptor, o que é crítico para sua interação com efetores a jusante.
• Mutações no GAB1 estão ligadas à surdez não sindrômica (DFNB26), destacando seu papel na função auditiva.
• Passa por acetilação e splicing alternativo, que podem modular sua atividade.
• Informações sobre a estrutura 3D estão disponíveis, fornecendo insights sobre sua arquitetura molecular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético correspondente aos resíduos ao redor da Tyr659 do GAB1 humano. Certifique-se de que seu sistema de detecção seja específico para a forma fosforilada; considere usar um anticorpo não específico para fosfo como controle.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de aproximadamente 77 kDa. Use a porcentagem de gel apropriada e condições de transferência para proteínas nesta faixa de massa. Valide a especificidade da banda usando lisatos tratados com fosfatase ou inibidores relevantes.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; a otimização das condições de revestimento e da concentração do anticorpo é recomendada. Inclua peptídeo fosforilado como controle positivo.
• A reatividade cruzada foi demonstrada com GAB1 humano e de camundongo. Ao usar amostras de camundongo, esteja ciente do potencial de fundo de imunoglobulinas de camundongo endógenas se usar anticorpos secundários anti-coelho.
• Como o GAB1 está envolvido em múltiplas vias de sinalização (EGFR, INSR, MET/HGF), considere a estimulação celular apropriada com fatores de crescimento (por exemplo, EGF, insulina, HGF) antes do preparo da amostra para induzir a fosforilação em Tyr659.
• Como o anticorpo é um policlonal de coelho, a consistência lote a lote deve ser verificada para aplicações quantitativas críticas.

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