Anti-Fosforilado do Receptor de Glicocorticóide-S211 pAb de Coelho para WB, ELISA - P04150

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Receptor de Glicocorticóide

• O receptor de glicocorticóide (GR), codificado pelo gene NR3C1, é um membro do membro 1 do grupo C da subfamília 3 dos receptores nucleares. Várias isoformas são geradas por splicing alternativo e iniciação alternativa da tradução, cada uma exibindo atividades transcriptionais e distribuições teciduais distintas.

• O GR atua como receptor para glicocorticóides, funcionando por um mecanismo duplo: como fator de transcrição que se liga a elementos de resposta a glicocorticóides (GREs) no DNA nuclear e mitocondrial, e como modulador de outros fatores de transcrição. Isso influencia respostas inflamatórias, proliferação celular e diferenciação. Referências relacionadas: PMID:27120390 PMID:37478846 PMID:28139699

• Ele está envolvido na remodelação da cromatina (PubMed:9590696) e desempenha um papel na degradação rápida de mRNA ao se ligar à 5' UTR dos mRNAs alvo e recrutar a helicase de RNA UPF1 e a enzima descapante de mRNA DCP1A, levando à degradação do RNA. Referências relacionadas: PMID:9590696 PMID:25775514

• O GR medeia ativação e repressão transcriptionais (PubMed:11435610, PubMed:15769988, PubMed:15866175), promove a apoptose induzida por glicocorticóides (PubMed:23303127) e suporta a segregação cromossômica precisa durante a mitose, sugerindo um papel supressor de tumor. Referências relacionadas: PMID:11435610 PMID:15769988 PMID:15866175 PMID:23303127 PMID:25847991

• A distribuição subcelular inclui citoplasma, núcleo, mitocôndrias, fuso mitótico, centrossomo e cromatina, refletindo seu deslocamento dinâmico e diversos sítios funcionais.

• O receptor é amplamente expresso em tecidos como osso, estômago, pulmão, fígado, cólon, mama, ovário, pâncreas, rim e coração, indicando sua ampla relevância fisiológica. Referências relacionadas: PMID:25847991 PMID:10902803

• Modificações pós-traducionais como fosforilação, acetilação, metilação e ubiquitinação regulam a estabilidade, localização subcelular e atividade transcriptional do GR. A fosforilação na Serina 211, dentro do domínio de transativação N-terminal, modula a função do receptor.

• As isoformas exibem uma gama de potências transcriptionais; por exemplo, a isoforma Beta atua como um inibidor dominante-negativo da isoforma Alfa, afetando a ligação hormonal e a regulação gênica, enquanto outras isoformas contribuem para o metabolismo da glicose e a sensibilidade à insulina. Referências relacionadas: PMID:20484466 PMID:7769088 PMID:8621628 PMID:26711253

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Use inibidores de fosfatase durante a preparação de amostras para Western blot para preservar o sinal de fosforilação na Ser211.
• Considere ensaios de bloqueio com peptídeos usando o peptídeo fosforilado e sua contraparte não fosforilada para confirmar a especificidade do anticorpo.
• Para ELISA, o peptídeo imunógeno pode servir como controle positivo e para padronizar as concentrações de revestimento.
• Dado o peso molecular previsto de ~86 kDa, otimize a porcentagem do gel de poliacrilamida e as condições de eletrotransferência para a transferência eficiente de proteínas de alto peso molecular.
• Valide o desempenho do anticorpo em linhas celulares humanas ou de camundongo estimuladas com glicocorticóides (por exemplo, dexametasona) para confirmar a detecção específica da fosforilação.

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