Phospho-GSK3β-S9 Rabbit pAb - P49841

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do GSK3β

• O GSK3β (glicogênio sintase quinase-3 beta) é uma serina/treonina proteína quinase constitutivamente ativa que regula negativamente a síntese de glicogênio, a sinalização Wnt e fatores de transcrição, fosforilando alvos como glicogênio sintase, beta-catenina e JUN. Referências relacionadas: PMID:11430833, PMID:12554650, PMID:14690523, PMID:1846781
• Na via Wnt, o GSK3β forma um complexo de destruição com APC e AXIN1, fosforilando a beta-catenina para direcioná-la à degradação proteossomal mediada por ubiquitina. Referências relacionadas: PMID:12554650
• A fosforilação da proteína associada aos microtúbulos TAU em Thr-548 pelo GSK3β reduz a capacidade do TAU de estabilizar os microtúbulos, um processo ligado à formação de emaranhados neurofibrilares na doença de Alzheimer. Referências relacionadas: PMID:14690523
• O GSK3β localiza-se no citoplasma, núcleo e membrana celular, permitindo sua participação em múltiplas cascatas de sinalização.
• É expresso em testículo, timo, próstata e ovário, com menor expressão no pulmão, cérebro e rim; em cérebros com doença de Alzheimer, colocaliza-se com EIF2AK2/PKR e TAU.
• A quinase também regula o ritmo circadiano fosforilando os componentes do relógio BMAL1 e CLOCK, e modula a autofagia via acetilação de KAT5/TIP60 sob privação. Referências relacionadas: PMID:19946213, PMID:28903391, PMID:30704899

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi gerado contra um peptídeo fosforilado sintético correspondente ao GSK3β humano ao redor do Ser9; confirme a especificidade fosfo-específica tratando as amostras com lambda fosfatase ou usando um ensaio de competição com peptídeo não fosforilado.
• O peso molecular previsto do GSK3β é de aproximadamente 47 kDa; otimize a porcentagem do gel SDS-PAGE e as condições de transferência para o Western blot para obter uma separação clara das bandas.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), considere a recuperação de antígenio induzida por calor em tampão citrato (pH 6,0) e titule o anticorpo primário para maximizar a relação sinal-ruído.
• Na imunofluorescência (IF/ICC), valide os protocolos de fixação e permeabilização para o seu sistema celular, pois o GSK3β pode se localizar em múltiplos compartimentos subcelulares.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato foi relatada; verifique a reatividade no tecido da sua espécie alvo ou lisado celular antes de experimentos em grande escala.

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