mAb de Coelho Anti-Phospho-HER2/ErbB2-Y1139 para WB e ELISA - P04626

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HER2/ErbB2

• O HER2 (Receptor tirosina quinase erbB-2) é uma proteína tirosina quinase que faz parte dos complexos de receptores de superfície celular, requerendo um coreceptor para a ligação do ligante. É essencial para a sinalização do receptor neuregulina, embora as neuregulinas não se liguem diretamente a ele.
• Regula o crescimento e a estabilização dos microtúbulos periféricos via via MEMO1-RHOA-DIAPH1, levando à inibição de GSK3B, associação de APC e CLASP2 à membrana e captura de microtúbulos por MACF1.
• No núcleo, o HER2 atua como fator de transcrição, ligando-se ao promotor de PTGS2/COX-2 na sequência 5'-TCAAATTC-3' e ativando sua transcrição, além de estar implicado na ativação de CDKN1A envolvendo STAT3 e SRC.
• Também aumenta a transcrição de rRNA pela RNA Pol I, promovendo a síntese proteica e o crescimento celular.
• Subcelularmente, o HER2 se localiza na membrana celular, rugas membranosas, endossomos precoces, citoplasma (perinuclear) e núcleo, o que é consistente com seus papéis duplos de sinalização e transcrição.
• Especificidade tecidual: Expresso em vários tecidos tumorais, incluindo tumores de mama primários e tumores do intestino delgado, esôfago, rim e boca.
• Características principais: É uma glicoproteína de membrana tipo I de passagem única com atividade quinase, contendo um sítio de ligação a ATP, sítios de fosforilação e pontes dissulfeto. Está envolvido em rearranjos cromossômicos, splicing alternativo e variantes associadas a doenças.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um peptídeo fosforilado sintético ao redor da tirosina 1139 do HER2 humano. Para Western blot, considere usar condições de bloqueio específicas para fosforilação e inibidores de fosfatase apropriados durante a preparação da amostra para preservar o epítopo fosforilado.
• Dado o peso molecular previsto de 138 kDa, garanta condições adequadas de separação em gel e transferência para proteínas de alto peso molecular na técnica de Western blotting.
• Para ELISA, é aconselhável validar o anticorpo com peptídeos fosforilados e não fosforilados para confirmar a especificidade. Inclua controles positivos e negativos apropriados, como lisados de linhagens celulares com superexpressão de HER2 e tratadas com fosfatase.
• A reatividade cruzada é reportada para humanos; verifique a reatividade com outras espécies, se necessário. Como o HER2 é um receptor transmembrana, considere usar frações enriquecidas de membrana para aumentar a detecção.

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