Fosfo-Histona H2AX-S139 mAb de Coelho para WB, IP, IF/ICC, ELISA - P16104

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H2AX

• Histona H2AX (H2A.X) é uma variante da histona H2A que substitui a H2A convencional em um subconjunto de nucleossomos.
• Desempenha um papel central na regulação da transcrição, reparo de DNA, replicação de DNA e estabilidade cromossômica compactando o DNA em cromatina e regulando a acessibilidade do DNA por meio de modificações pós-traducionais.
• Fosforilação em Ser139 (γ-H2AX) é crítica para o reconhecimento de quebras de fita dupla de DNA (DSBs) e recrutamento da maquinaria de reparo de DNA, tornando-a um marcador chave para dano de DNA.
• Necessária para a parada do ciclo celular mediada por ponto de verificação em resposta a baixas doses de radiação ionizante e para reparo eficiente de DSBs.
• Localizada no núcleo e associada aos cromossomos.
• Sujeita a múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e ubiquitinação, que ajustam sua função na resposta ao dano de DNA.
• O gene H2AX (H2AFX) é membro da família de genes da histona H2A e é amplamente conservado.
• Seu peso molecular previsto é de aproximadamente 15 kDa, consistente com sua migração típica em SDS-PAGE.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético em torno da S139 da Histona H2AX humana; para detecção específica de fosfo, considere incluir inibidores de fosfatases durante o preparo da amostra.
• Para validar a especificidade do anticorpo para a forma fosforilada, compare sinais de lisados não tratados versus lisados tratados com fosfatase.
• Para Western blot, espera-se uma banda em torno de 15 kDa; certifique-se de usar marcadores de peso molecular adequados.
• Em imunofluorescência, focos de γ-H2AX são um marcador clássico de quebras de fita dupla de DNA; considere induzir dano de DNA com agentes como etoposídeo ou radiação ionizante para aumentar o sinal.
• Para ELISA, use um peptídeo fosforilado como antígeno de revestimento e uma contraparte não fosforilada como controle negativo.

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