pAb de coelho para Phospho-Histona H3-T3 para WB, ELISA - Q16695 / P68431

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

• Histona H3.1t (também designada H3/g ou H3.4) é uma variante específica de testículo da histona H3 canônica. É codificada pelo gene H3-4 (HIST3H3) e pertence à grande família das histonas H3, que inclui genes adicionais como o HIST1H3A.
• Como histona central, H3 se monta com H2A, H2B e H4 no octâmero de histonas que forma o nucleossomo, a unidade repetitiva fundamental da cromatina. Os nucleossomos empacotam o DNA em uma estrutura compacta que restringe o acesso à informação genética.
• Essa compactação desempenha um papel central na regulação da transcrição, replicação do DNA, reparo do DNA e na estabilidade cromossômica geral. O desempacotamento controlado ou a remodelação dos nucleossomos permite que a maquinaria celular leia, copie ou repare o molde de DNA.
• A função das histonas é regulada dinamicamente por um conjunto complexo de modificações pós-traducionais em suas caudas N-terminais – o "código das histonas". Isso inclui fosforilação (por exemplo, em Thr‑3), acetilação, metilação e muitas outras, que atuam em conjunto para modular o estado da cromatina e recrutar proteínas efetoras downstream.
• A H3.1t se localiza exclusivamente no núcleo e é integrada à cromatina. Consistente com seu papel no empacotamento do DNA, ela está fortemente associada aos cromossomos ao longo de todo o ciclo celular.
• A expressão da H3.1t é amplamente restrita às células testiculares, o que sugere uma função especializada na reorganização da cromatina durante a espermatogênese. Outras variantes de H3 são expressas de forma mais ampla e desempenham funções nucleossomais semelhantes em células somáticas.
• As palavras-chave da UniProt para H3.1t incluem "Fosfoproteína", "Acetilação", "Metilação", "Citrulinização" e "ADP-ribosilação", destacando a extensa paisagem de modificações que governa suas funções.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopepetídeo sintético que abrange Thr‑3 do HIST1H3A humano. Esse desenho tem como objetivo gerar anticorpos que reconheçam especificamente a forma fosforilada da histona H3. Os pesquisadores devem confirmar a especificidade comparando os sinais entre amostras tratadas com fosfatase e amostras não tratadas.
• O anticorpo é validado para Western blotting (WB) e ELISA. Para WB, podem ser usados lisados de células totais ou extratos enriquecidos em histonas, e é esperada uma banda próxima de 15 kDa. A migração pode variar dependendo do status de modificação da H3. Sempre inclua inibidores de fosfatase durante a lise e preparação de amostras para preservar o sinal de fosforilação.
• Em ELISA, considere revestir a placa com o peptídeo fosforilado ou a proteína histona fosforilada. Inclua controles apropriados (por exemplo, não fosfopepetídeo) para avaliar a especificidade de ligação.
• A reatividade cruzada prevista é ampla (humano, camundongo, rato e outros) devido à alta conservação da cauda N-terminal da H3 entre vertebrados. No entanto, recomenda-se a validação na espécie e tecido de interesse antes de aplicações quantitativas.
• Para aplicações imunohistoquímicas ou imunocitoquímicas, observe que o anticorpo não foi desenvolvido originalmente para esses formatos; é aconselhável realizar testes piloto com condições apropriadas de recuperação de antígeno e detecção.

CamelBio: Sua Ponte de Fornecimento Integrada

A CamelBio é especializada em fornecer a fabricantes de diagnósticos, laboratórios e institutos de pesquisa acesso direto a um portfólio abrangente de anticorpos de grau IVD e matérias-primas auxiliares. Este anticorpo fosfo-específico de histona H3 apoia pesquisas em epigenética, biologia da cromatina e desenvolvimento de biomarcadores para câncer. Com nossa rede de suprimentos estabelecida, facilitamos o fornecimento de pares de anticorpos validados, anticorpos monoclonais e policlonais otimizados, reagentes auxiliares a granel e matérias-primas alvo de difícil obtenção para simplificar o desenvolvimento desde a concepção até a clínica.