Phospho-HSF1-S326 Rabbit pAb para WB, ELISA - Q00613

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HSF1 (Fator de Choque Térmico 1)

• O HSF1 funciona como um fator de transcrição indutível por estresse que impulsiona a expressão de proteínas de choque térmico (HSPs) para proteger as células de danos. Em células não estressadas, é mantido como um monómero inativo num complexo com HSP90; sob estresse, oligomeriza-se, liga-se a elementos de choque térmico (HSEs) e ativa a transcrição de genes HSP. Referências relacionadas: PMID:11447121, PMID:12659875, PMID:12917326, PMID:11583998, PMID:16278218, PMID:9727490, PMID:10359787
• Após o estresse de choque térmico, o HSF1 forma um complexo associado à cromatina com TTC5/STRAP e p300/EP300 para estimular a transcrição da HSR, aumentando assim a sobrevivência celular. Referências relacionadas: PMID:18451878
• O HSF1 ativa a transcrição de FOXR1, que por sua vez regula positivamente as chaperonas de choque térmico HSPA1A e HSPA6 e a redutase antioxidante DHRS2. Referências relacionadas: PMID:34723967
• Para além da ativação transcricional, o HSF1 reprime a transcrição de c-fos induzida por Ras, promove o processamento da extremidade 3' do pré-mRNA do HSP70 e media a exportação nuclear do mRNA do HSP70. Referências relacionadas: PMID:9341107, PMID:14707147, PMID:17897941
• O HSF1 desempenha um papel na progressão mitótica e atua como um regulador negativo da reparação de DNA por junção de extremidades não homólogas (NHEJ). Referências relacionadas: PMID:18794143, PMID:26359349
• O HSF1 está envolvido na reativação latente do HIV-1 ao ligar-se ao promotor LTR viral e recrutar fatores de alongamento da transcrição.
• O HSF1 localiza-se no núcleo, citoplasma e associa-se aos polos do fuso, centríolos e cinetocoros. É regulado por fosforilação em múltiplos locais, incluindo a serina 326, que é crítica para a sua ativação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi produzido contra um fosfopeptídeo sintético que abrange a serina 326 do HSF1 humano e reconhece especificamente a forma fosforilada. Inclua inibidores de fosfatases nos tampões de lise para proteger o epítopo.
• Para WB, o peso molecular esperado é de ~57 kDa. Utilize lisados de células humanas submetidas a choque térmico versus não tratadas como controlos positivos/negativos. Considere tratar as amostras com fosfatase lambda para confirmar a especificidade fosfo.
• Em ELISA, otimize a concentração do antigénio de revestimento e a diluição do anticorpo. Combine com um sistema de deteção adequado para análise quantitativa.
• Valide a reatividade cruzada no seu sistema experimental (esperado para amostras humanas).

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