Anticorpo Policlonal de Coelho Phospho-IGF1R-Y1165/1166/INSR-Y1189/1190 - P08069 / P06213

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Phospho-IGF1R/INSR

• O receptor do fator de crescimento semelhante à insulina 1 (IGF1R) é uma tirosina quinase de receptor que se liga ao IGF1 com alta afinidade, e ao IGF2 e à insulina com menor afinidade. Desempenha um papel fundamental no crescimento e sobrevivência celular e é crucial para a transformação tumoral e a sobrevivência de células malignas.
• A ligação do ligante desencadeia a autofosforilação do receptor em resíduos de tirosina, incluindo Y1165 e Y1166 na alça de ativação, levando ao recrutamento e fosforilação em tirosina de proteínas adaptadoras como IRS1/2, Shc e proteínas 14-3-3.
• O IRS1 fosforilado ativa duas principais cascatas de sinalização: a via PI3K-AKT/PKB, que inibe a apoptose e promove a síntese proteica via mTOR, e a via Ras-MAPK, que impulsiona a proliferação celular.
• O IGF1R também sinaliza através da via JAK/STAT; a ativação do STAT3 pode ser essencial para a atividade transformadora do receptor. Além disso, as quinases JNK podem ser ativadas e o IGF1 exerce efeitos inibitórios sobre a JNK via ASK1.
• O IGF1R pode formar receptores híbridos com o receptor de insulina (INSR). Esses híbridos ligam-se ao IGF1 com alta afinidade; dependendo da isoforma do INSR, podem apresentar ligação diferencial ao IGF2 e à insulina. Referências relacionadas: PMID:12138094, PMID:16831875
• Em nível subcelular, o IGF1R localiza-se na membrana celular.
• É expresso em uma ampla gama de tecidos e frequentemente superexpresso em tumores, incluindo melanomas e cânceres de cólon, pâncreas, próstata e rim. Como receptor híbrido com o INSR, é encontrado no músculo, coração, rim, tecido adiposo e outros locais.
• Modificações pós-traducionais incluem autofosforilação, clivagem em resíduos básicos, formação de ligações dissulfeto, glicosilação e ubiquitinação. O peso molecular calculado do precursor não processado é de aproximadamente 154 kDa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético que abrange os locais de fosforilação da alça de ativação (Y1165/Y1166) do IGF1R humano, que são conservados no INSR (Y1189/Y1190). Este design visa a forma cataliticamente ativa e fosforilada de ambos os receptores.
• Para análise por Western blot, inclua inibidores de fosfatases no seu tampão de lise para preservar a fosforilação. Os pesos moleculares previstos para os precursores de IGF1R e INSR são de aproximadamente 154 kDa e 155/156 kDa, respectivamente; os receptores maduros podem aparecer como múltiplas bandas devido ao processamento proteolítico.
• Ao configurar o ELISA, considere usar um método de revestimento específico para fosfo ou um formato baseado em competição para garantir a detecção do receptor ativado em lisados celulares ou teciduais.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato foi relatada, mas recomenda-se a validação no seu sistema específico de amostras.

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