Fosfo-INSR-Y1146/IGF1R-Y1131 pAb de Coelho para WB, ELISA - P06213 / P08069

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do INSR e IGF1R

• O recetor de insulina (INSR) é uma tirosina cinase de recetor que medeia as ações pleiotrópicas da insulina após a ligação do ligando.
• O INSR ativado fosforila substratos intracelulares (IRS1-4, SHC), levando à ativação de duas vias de sinalização principais: PI3K-AKT (ações metabólicas) e Ras-MAPK (crescimento e diferenciação celular).
• A via PI3K-AKT promove a translocação do transportador de glucose SLC2A4/GLUT4, efeitos anti-apoptóticos (via fosforilação de BAD) e sinalização mTORC1; a via Ras-MAPK regula a expressão génica e coopera com a PI3K para o crescimento celular.
• O INSR forma recetores híbridos com o IGF1R. Os recetores híbridos contendo a isoforma Long do INSR são ativados com alta afinidade pelo IGF1, baixa afinidade pelo IGF2, e não significativamente pela insulina (PubMed:12138094); aqueles com a isoforma Short são ativados por IGF1, IGF2 e insulina. Outro estudo sugeriu características de ligação semelhantes para ambos os tipos híbridos (PubMed:16831875). Referências relacionadas: PMID:12138094 PMID:16831875
• A localização subcelular inclui a membrana celular, endossomas tardios e lisossomas, refletindo a internalização e tráfego do recetor.
• As isoformas Long e Short são predominantemente expressas em tecidos alvo de insulina (fígado, tecido adiposo, músculo esquelético) e também encontradas em vários outros tecidos e tumores; a isoforma Short é preferencialmente expressa em células fetais.
• O INSR sofre autofosforilação em múltiplos resíduos de tirosina, incluindo Y1146, que é crítica para a propagação do sinal a jusante.
• Características estruturais principais incluem splicing alternativo, domínios extracelulares de ligação de ligando, uma hélice transmembranar e um domínio intracelular de tirosina cinase.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para deteção específica de fosfo, inclua inibidores de fosfatases nos tampões de lise e valide a especificidade tratando as amostras com fosfatase alcalina ou usando competição com peptídeo não fosforilado.
• Use controlos positivos apropriados, como linhas celulares estimuladas com insulina, e monitore bandas próximas de 155 kDa no Western blot.
• Para ELISA, otimize as condições de revestimento e confirme a linearidade do ensaio com padrões de peptídeo fosforilado.
• Considere que o anticorpo pode reconhecer ambas as formas fosforiladas de INSR e IGF1R; verifique a identidade do alvo no seu sistema.

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