Fosfo-IRE1-S724 pAb de Coelho - O75460

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do IRE1

• O IRE1 (também conhecido como ERN1, IRE1α) é uma serina/treonina-proteína quinase e endorribonuclease de função dupla que atua como um sensor primário para a resposta à proteína não dobrada do retículo endoplasmático (UPR). Referências relacionadas: PMID:11175748, PMID:11779464, PMID:12637535
• Em células não estressadas, o IRE1 é mantido em um estado monomérico inativo através da ligação à chaperona do RE HSPA5/BiP. Referências relacionadas: PMID:21317875
• Após o acúmulo de proteínas mal dobradas, o HSPA5/BiP dissocia-se, permitindo a homodimerização do IRE1 e a trans-autofosforilação do domínio da quinase, o que ativa a função da endorribonuclease. Referências relacionadas: PMID:21317875
• O domínio da endorribonuclease cliva especificamente o mRNA do XBP1, removendo um íntron de 26 nucleotídeos para gerar o XBP1 emendado (XBP1s). Referências relacionadas: PMID:11779464, PMID:21317875, PMID:24508390
• O XBP1s codifica um potente fator de transcrição que aumenta a expressão de genes envolvidos no dobramento de proteínas do RE, controle de qualidade e degradação, restaurando a homeostase do RE. Referências relacionadas: PMID:11779464, PMID:21317875, PMID:24508390
• Além do emendamento do XBP1, o IRE1 também regula vias de secreção de proteínas não convencionais, como o tráfego induzido por estresse de RE do CFTR para a membrana celular via GORASP2 e SEC16A. Referências relacionadas: PMID:21884936, PMID:28067262
• O IRE1 é expresso de forma onipresente, com níveis particularmente altos no tecido pancreático, refletindo a alta demanda secretória das células pancreáticas.
• Como uma proteína de membrana do retículo endoplasmático, o domínio luminal N-terminal do IRE1 detecta o estresse de RE, enquanto sua região citosólica C-terminal abriga as atividades da quinase e da endorribonuclease.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo é produzido contra um peptídeo fosforilado correspondente à região S724 do IRE1α humano. Para verificar a especificidade fosfo-específica, considere o tratamento das amostras com λ-fosfatase antes da análise por Western blot.
• Para WB, o IRE1 migra em aproximadamente 110 kDa. Certifique-se de um bloqueio completo da membrana e inclua controles positivos (lisados de células sob estresse de RE) e negativos (células não estressadas) apropriados para confirmar a identidade da banda.
• Em IHC-P, as condições de recuperação de antígeno podem exigir otimização. Inclua um controle de isotipo e valide os padrões de colorização contra a distribuição tecidual conhecida do IRE1.
• A reatividade cruzada com o IRE1 de camundongo e rato é relatada; no entanto, o alinhamento da sequência do epítopo em torno de S724 é recomendado para confirmar a conservação nestas espécies.
• Como um anticorpo policlonal de coelho, o desempenho lote a lote pode variar. Valide cada novo lote em seu sistema de ensaio específico para garantir a consistência.

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