Fosfo-IRS1-S307 (Específico Humano) pAb de Coelho para WB, IHC-P, ELISA - P35568

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Substrato 1 do Receptor de Insulina

• O substrato 1 do receptor de insulina (IRS1) é um adaptador de sinalização crítico que transmite sinais do receptor de insulina (INSR) e do receptor do fator de crescimento semelhante à insulina 1 (IGF1R) para vias de sinalização a jusante, desempenhando um papel fundamental na homeostase da glicose e no crescimento (PubMed:7541045, 33991522, 38625937). Referências relacionadas: PMID:7541045 PMID:33991522 PMID:38625937

• Após a fosforilação, o IRS1 atua como um andaime de ancoragem para proteínas contendo domínio SH2, como a subunidade p85 da PI3K, GRB2 e SHP2, iniciando assim as cascatas de sinalização PI3K/AKT e Ras/MAPK (PubMed:11171109, 8265614). Referências relacionadas: PMID:11171109 PMID:8265614

• O IRS1 modula positivamente a via Wnt/β-catenina ao impedir a degradação mediada por autofagia de DVL2, o que promove a proliferação celular (PubMed:24616100). Referências relacionadas: PMID:24616100

• O braço PI3K/AKT da sinalização do IRS1 é central para os efeitos metabólicos da insulina, incluindo a captação de glicose e a síntese de glicogênio, enquanto o ramo Ras/MAPK regula a expressão gênica e o crescimento celular.

• O IRS1 está predominantemente localizado no citoplasma, mas também pode ser detectado no núcleo, onde pode se associar a proteínas nucleares para influenciar a transcrição.

• Como uma fosfoproteína altamente regulada, o IRS1 sofre fosforilação de serina/treonina em múltiplos sítios; acredita-se que a fosforilação em S307 em humanos modula a duração e a sensibilidade do sinal de insulina.

• A função aberrante do IRS1 está implicada na resistência à insulina, diabetes tipo 2 e distúrbios metabólicos relacionados.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Como o anticorpo tem como alvo o sítio de fosforilação S307, é fundamental usar inibidores de fosfatase durante a preparação da amostra para preservar os sinais de fosforilação.
• Para Western blot, considere otimizar a diluição do anticorpo e verificar a especificidade com bloqueio de peptídeo não fosforilado ou lisados tratados com fosfatase.
• No IHC-P, pode ser utilizada a recuperação de antígeno induzida por calor padrão; valide os padrões de coloração em controles de tecido positivos e negativos.
• É esperada reatividade cruzada com IRS1 de camundongo e rato devido à alta homologia de sequência ao redor de S307, mas confirme a especificidade no seu sistema modelo.
• Para aplicações em ELISA, certifique-se de que o antígeno de revestimento contém o epítopo fosforilado e considere um formato de captura/detecção.

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