Anticorpo Monoclonal de Coelho Fosfo-JAK2-Y1007/1008 para WB, ELISA - O60674

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da JAK2

• A JAK2 é uma proteína tirosina quinase não transmembrana que fosforila receptores de citocinas tipo I (ex.: GHR, EPOR, MPL) e receptores tipo II (ex.: receptores de IFN, interleucinas), iniciando cascatas de sinalização a jusante. Referências relacionadas: PMID:15690087 PMID:15899890 PMID:7615558
• Medeia sinalização essencial na imunidade inata e adaptativa, e está envolvida em processos como crescimento celular, desenvolvimento, diferenciação e modificações de histonas.
• Após a ligação do ligante, a JAK2 fosforila resíduos de tirosina específicos nas caudas citoplasmáticas do receptor, criando sítios de ancoragem para proteínas STAT; em seguida, fosforila os STATs, que dimerizam e se translocam para o núcleo para regular a transcrição gênica. Referências relacionadas: PMID:9618263
• Na eritropoiese, a estimulação por EPO leva à autofosforilação e ativação da JAK2, associação com o EPOR e subsequente fosforilação e ativação do STAT5, o que promove a transcrição de genes relacionados à eritropoiese. Referências relacionadas: PMID:9657743
• No núcleo, a JAK2 fosforila a histona H3 na Tyr-41 (H3Y41ph), uma modificação que exclui a HP1α da cromatina, desempenhando assim um papel direto na regulação epigenética. Referências relacionadas: PMID:19783980
• A localização subcelular inclui o sistema endomembranar, citoplasma e núcleo, consistente com suas funções duplas de sinalização citoplasmática e nuclear.
• Expressa de forma ubíqua na maioria dos tecidos, refletindo seu amplo papel na sinalização por citocinas.
• Características estruturais-chave incluem um domínio SH2 e domínios quinase-like em tandem; classificada como uma tirosina-proteína quinase, reguladora de cromatina e proto-oncogene.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um peptídeo fosforilado sintético abrangendo Y1007 e Y1008; espera-se que reconheça especificamente a JAK2 apenas quando fosforilada nesses sítios do loop de ativação.
• Para WB, considere o uso de coquetéis de inibidores de fosfatase durante o preparo da amostra e execute controles positivos/negativos apropriados (ex.: células estimuladas vs. não estimuladas) para confirmar a especificidade para fosforilação.
• O peso molecular previsto da JAK2 é ~131 kDa; verifique a migração da banda em relação aos marcadores de peso molecular e considera possíveis modificações pós‑traducionais.
• O pré‑tratamento de lisados celulares com fosfatase lambda pode servir como um controle útil para determinar a especificidade para fosforilação.
• Para ELISA, siga protocolos padrão de imobilização e detecção; o pareamento com um anticorpo total de JAK2 pode permitir a normalização dos níveis de fosforilação.

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