pAb de coelho para Phospho-LCK-Y394 - P06239

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da LCK

• A LCK é uma proteína quinase de tirosina não receptora essencial para a seleção e maturação de células T no timo, além da função de células T maduras.
  Referências relacionadas: PMID:2470098
• Após o acoplamento do receptor de célula T (TCR) ao peptídeo-MHC, a LCK é recrutada para o complexo TCR-CD3 e fosforila resíduos de tirosina dentro dos ITAMs das cadeias CD3 e TCR, desencadeando o recrutamento de ZAP70 e a produção de linfocinas downstream.
  Referências relacionadas: PMID:2470098 PMID:40592325
• A LCK também participa da sinalização via receptores CD2 e IL2: a associação com CD2 leva à hiperfosforilação da LCK, e a ligação de IL2 aumenta a atividade da LCK para promover a proliferação de células T.
• Ela fosforila múltiplos substratos, incluindo RUNX3, PTK2B/PYK2, MAPT, RHOH e TYROBP, e interage com FYB2.
  Referências relacionadas: PMID:27335501
• Localiza-se na membrana celular, citoplasma e citosol.
• É expressa especificamente em células linfoides.
• Anotada com palavras-chave como splicing alternativo, ligação a ATP, quinase, fosfoproteína, proto-oncogene, domínios SH2 e SH3 e lipidação (miristato e palmitato), refletindo sua regulação multifacetada.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético ao redor de Tyr394, portanto, espera-se que o anticorpo reconheça especificamente a LCK fosforilada neste sítio da alça de ativação.
• Para WB, use inibidores de fosfatase durante a preparação da amostra para preservar a fosforilação. É esperada uma banda de ~58 kDa em lisados de células linfoides de humanos e camundongos.
• Valide o desempenho do anticorpo em modelos de células T apropriados (por exemplo, células Jurkat) estimulados por CD3/CD28 para induzir uma fosforilação robusta de Tyr394.
• A IF/ICC pode exigir fixação/permeabilização otimizada; considere testar em células T ativadas ou cortes de tecido de timo.

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